Загрузка...
Учебная работа. Гнойный бактериальный менингит. Микробиологическая диагностика
МУЗ «ПЕРВАЯ ГОРОДСКАЯ КЛИНИЧЕСКАЯ БОЛЬНИЦА СКОРОЙ МЕДИЦИНСКОЙ ПОМОЩИ»
СЕВЕРНЫЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ
КУРС КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ
Управляющий курса
проф. Воробьёва Н. А.
Гнойный бактериальный менингит. Микробиологическая другими словами заключения о сути заболевания и состоянии пациента»>диагностика (процесс установления диагноза, то есть заключения о сущности болезни и состоянии пациента)
Выполнила
врач-интерн КДЛ
Петрова Л. В.
г. Архангельск
2009 г.
Оглавление
Введение
анализ и учет результатов История
Частота и встречаемость гнойного бактериального менингита в мире зависимо от возбудителя
Черта возбудителей гнойных бактериальных менингитов
Haemophilus influenzae
Neisseria meningitidis
Streptococcus pneumoniae
Остальные возбудители
Патогенез бактериального менингита
Микробиологическая другими словами заключения о сути заболевания и состоянии пациента»>диагностика (процесс установления диагноза, то есть заключения о сущности болезни и состоянии пациента) гнойных бактериальных менингитов
Показания к лабораторному исследованию
Микробиологическая другими словами заключения о сути заболевания и состоянии пациента»>диагностика (процесс установления диагноза, то есть заключения о сущности болезни и состоянии пациента) гнойных бактериальных менингитов
Бактериологическое исследование спинномозговой воды хворого
Бактериологическое исследование крови (внутренней средой организма человека и животных)
Бактериологическое исследование экссудата из петехий
Бактериологическое исследование носоглоточной слизи на менингококк
исследование трупного материала
способы серологической идентификации менингококков либо их антигенов
Реакция агглютинации в полистироловых пластинках
Реакция микропреципитации для определения серогруппы менингококков
Способ ВИЭФ.
Использованию реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) для выявления термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека)
Показания к проведению серологических исследовательских работ
методика постановки РНГА с эритроцитарными менингококковыми диагностикумами
Взятие крови (внутренней средой организма человека и животных)
Учет реакции
Рекомендуемые сроки, кратность обследования и трактовка серологических результатов
РНГА при генерализованных формах менингококковой инфекции (Термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека).
РНГА с диагностикумами А и С
РНГА с диагностикумом серогруппы В
Групповая специфика РНГА
РНГА при локализованных формах менингококковой инфекции (Термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека) (назофарингит и бактерионосительство)
РНГА при иммуно-эпидемиологических исследовательских работах
Применение РНГА для оценки эффективности вакцинопрофилактики менингококковой инфекции (Термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека).
Современные способы генодиагностики гнойных бактериальных менингитов
Общие сведения и принципы
Показания к применению способа
Выделение ДНК (Дезоксирибонуклеиновая кислота — макромолекула, обеспечивающая хранение, передачу из поколения в поколение и реализацию генетической программы развития и функционирования живых организмов)
Ожидаемый эффект от внедрения способа
задачки
Сроки выдачи ответов и их формулировка
Заключение
- Перечень использованных источников
Введение
Менингиты бактериальной природы — тяжелейшие заразные работоспособности»> работоспособности»>заболевания (нарушения нормальной жизнедеятельности, работоспособности), при которых в заразный процесс вовлекаются мягенькие мозговые оболочки основания мозга и высшая часть спинного мозга (центральный отдел нервной системы животных и человека).
Локализация очага воспаления, а так же соответствующие для этих болезней тяжелейшие клинические проявления и генерализация процесса с поражением разных органов и тканей показывает на необходимость резвого решения вопросца о этиологии работоспособности»> работоспособности»>заболевания (нарушения нормальной жизнедеятельности, работоспособности) и предназначения адекватной бактерицидной для снятия или устранения симптомов и проявлений заболевания»>терапии (терапия — процесс, для снятия или устранения симптомов и проявлений исследование главных био параметров у возбудителей лежат в базе определения прогностических критериев в системе эпидемиологического надзора за бактериальными менингитами.
Правильно организованная, всеохватывающая, лабораторная другими словами заключения о сути заболевания и состоянии пациента»>диагностика (процесс установления диагноза, то есть заключения о сущности болезни и состоянии пациента) гнойных бактериальных менингитов хоть какой этиологии дозволяет достоверно надзирать состояние трудности данной нам заразной патологии.
История
В двадцатом столетии население земли достигнуло впечатляющих фурроров в борьбе с заразными болезнями. Одни работоспособности»>заболевания отступали в силу естественных обстоятельств, остальные — благодаря увеличению уровня жизни и профилактике.
К особенной группе жизнеугрожающих для человека и животрепещущих до сего времени болезней относится бактериальный менингит, история которого уходит в глубокую древность. 1-ые упоминания о свойства менингита, а в 1805 г. в первый раз зарегистрирована и тщательно освещена эпидемия цереброспинального менингита в Женеве. В следующем не раз упоминалось о бессчетных вспышках, переходивших иногда в эпидемии, которые имели обширное территориальное распространение и длилось в течение почти всех лет. Узнаваемый французский исследователь, изучавший менингиты в Африке (60-е годы), доктор Л. Лапессони так излагает свое воспоминание от малышей, лежащих в лихорадочном состоянии и на то, как стремительно наступает коматозное состояние и судороги (Спазм, судорога, корча — непроизвольное сокращение маленькая мышь»>мышцы), на сраженных заболеванием, как ударом молнии, понимаешь, почему даже упоминание о ужас, беспокойство, чувство безысходности и непредотвратимой неудачи».
Отношение к время. Невзирая на достигнутый прогресс в отношении этиологии и патогенеза, также на развитие новейших направлений в обстоятельств летальности и инвалидизации, тем подтверждая высшую социальную значимость бактериальных менингитов в бесконечном перечне остальных болезней человека.
Частота и встречаемость гнойного бактериального менингита в мире зависимо от возбудителя
Бактериальный менингит — часто встречающееся работоспособности, за крайнее десятилетие отмечено понижение частоты заболеваемости практически на одну вторую. В Рф средняя частота встречаемости бактериального менингита — 3 на 100000 населения. Главным этиологическим фактором является N.meningitidis (60%), S.pneumoniae (30%) и H.influenzae (10%).
В США (Соединённые Штаты Америки — года главными этиологическими факторами бактериального менингита были три возбудителя — H.influenzae, N.meningitidis и S.pneumoniae, которые были предпосылкой малышей, в возрасте до 12 месяцев.
Но, с возникновением вакцин (HibTITER, Pedvax HIB, ProHIBit) случаев H.influenzae — опосредованных менингитов сделалось существенно меньше. Так, в США (Соединённые Штаты Америки — сейчас важной предпосылкой бактериального менингита является S.pneumoniae. Так, в США (Соединённые Штаты Америки — бактерицидную для снятия или устранения симптомов и проявлений заболевания»>терапию (терапия — процесс, для снятия или устранения симптомов и проявлений малышей в возрасте до 6 месяцев и у старых лиц. Частота заразного менингита посреди новорожденных в Скандинавских странах составила 1,9 на 100.000 новорожденных; смертность превысила 5%.
Значимой неувязкой одноклеточнае мельчайшие организмы»>бактерицидной часть из которых имеют МПК к пенициллину наиболее 2 мг/л.
Вторым по значимости возбудителем бактериального менингита (в Рф — первым) является N.meningitidis (серотипы A и С). В США (Соединённые Штаты Америки — малышей, подростков и юных лиц (от 2 до 18 лет).
В Исладии, как и в Рф, N.meningitidis вызывает наибольшее число болезней — 56%, тогда как Str. pneumoniae встречался в 20%, а H. influenzae и Listeria monocytogenes в 5% случаев соответственно. Смертность от менингита она составила 20% взрослого населения; при менингококковой инфекции (Термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека) — 16,2%, при пневмококковой — 25,9%.
Стрептококки группы В и Listeria monocytogenes являются предпосылкой бактериального менингита у малышей в неонатальном периоде (1-3% от всех случаев менингита у малышей). Listeria monocytogenes является предпосылкой менингита у старых, ослабленных нездоровых и пациентов с иммунодефицитом на фоне нейтропении. У пациентов с шунтами важными этиологическими факторами инфекции (Термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека) ЦНС (центральная нервная система, головной часть выделенных штаммов — энтеробактерии, K. pneumoniae, P.aeruginosa, Serratia spp., Acinetobacter baumannii, Salmonella группы B и D, Proteus mirabilis — полирезистентны к применяемым для для снятия либо устранения симптомов и проявлений термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека) ЦНС (центральная нервная система, головной обычно расположенный в головном отделе тела и представляющий собой компактное скопление нервных клеток и их отростков»>мозг) увеличивается у нездоровых опосля нейрохирургических вмешательств.
Процент послеоперационных менингитов — 1,8%.. Посреди этиологической структуры преобладают Staph. aureus, псевдомонады (P. aeruginosa), K. pneumoniae и пореже — энтеробактерии, а у пациентов с ликворреей — пневмококки.
нужно держать в голове о вторичном менингите, развивающемся как отягощение патологии ЛОР-органов, и до этого всего — среднего отита. Частота данного отягощения — 22% посреди всех случаев бактериального менингита.
Черта возбудителей гнойных бактериальных менингитов
Haemophilus influenzae
Согласно «Определителя микробов Берджи» Haemophilus influenzae вместе с иными бессчетными представителями (наиболее 15 видов) относят к роду Haemophilus, который заходит в семейство Pasteurellaceae (подгруппа 3), относящиеся к 5 группе микробов, включающей все факультативно-анаэробные грамотрицательные палочки. Из организма человека можно выделить 8 видов гемофилов, при этом лишь 2 из их — Haemophilus influenzae и Haemophilus duckreyi являются главными патогенами человека.
Haemophilus influenzae — маленькие (0,3 — 0,4 * 1 — 1,5 мкм) грамотрицательные, сферические, овальные и палочковидные клеточки. время от времени образуют нити и имеют приметный полиморфизм, в особенности в материале от нездоровых, которые получали в-лактамные лекарства. Гемофилы недвижны, спор не образуют, медлительно окрашиваются анилиновыми красителями. Каталазоположительны. Оксидазоположительны.
Haemophilus influenzae — факультативный анаэроб, отлично возрастающий на воздухе. Большая часть видов Haemophilus при культивировании требуют присутствия в питательной среде X и/либо V причин. Термостабильный фактор роста X (гемин) появляется из гема методом подмены двухвалентного иона железа на трехвалентный. Гем, в свою очередь, в обилии содержится в эритроцитах, входя в состав гемоглобина. Фактор V — это термолабильный кофермент никотинамидадениндинуклеотид (НАД), участвующий в окислительно-восстановительных реакциях бактериальных клеток. Фактор V синтезируется микробов (к примеру сардинами, стафилококками, нейссериями и иными) и находится в звериных клеточках, в том числе в эритроцитах. Добавление в питательную среду НАД удовлетворяет Потребность микробов в факторе V. Снутри рода мельчайшие организмы дифференцируют по потребности в обозначенных факторах роста и на основании биохимических параметров.
Haemophilus influenzae нуждается как в X, так и в V факторах роста. Температурные границы роста гемофилов +24 — +43°С, лучшая +37°С. Исходя из того, что гемофилам для культивирования нужны причины роста (X и/либо V), хорошей средой является «шоколадный» агар, в который заходит гретая цвета). Капсульные бактерии Haemophilus influenzae содержат капсульный полисахарид 1-го из 6 типов (а, b, с, d, e, f), которые различаются по составу входящих в него углеводов и антигенным свойствам.
Основную эпидемиологическую опасность представляет Haemophilus influenzae типа «b», потому что вызывает тяжелейшие менингиты, сепсис, пневмонии и остальные заразные работоспособности»> работоспособности»>заболевания (нарушения нормальной жизнедеятельности, работоспособности). Капсульный антиген Hib состоит из полирибозилрибитолфосфата (PRP либо ПРФ). идентификация Haemophilus influenzae по ферментативной и метаболической активности представляет определенные трудности из-за значимого различия характеристик у разных штаммов 1-го и такого же вида. Но, определение метаболизма индола, уреазы и орнитиндекарбоксилазы (ОДС) является нужным условием для биотипирования Hib, которое дозволяет найти биотип с I по VIII.
Neisseria meningitidis
Возбудителем менингококковой инфекции (Термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека) является менингококк (Neisseria meningitidis), который относят к роду нейссерий, включенному (согласно «Определителя микробов Берджи») в состав 4-й группы микробов, озаглавленной как «Грамотрицательные, аэробные/микроаэрофильные палочки и кокки». Род нейссерий включает два вида патогенных микробов: N.meningitidis и N. gonorrhoeae, другие представители этого рода являются резидентной флорой слизистых оболочек. К крайним относятся пигментообразующие, объединенные в один вид N.subflava, также N.sicca, N.mucosa, N.flavescens, N.lactamica. Катаральный диплококк выделен в род Вranhamella, включающий: B.catarrhalis, B.caviae, B.ovis и B.cuniculi.
Менингококки требовательны к условиям культивирования. При росте требуют завышенной влажности и 5-10% содержания СО2 в воздухе, чувствительны к мельчайшим отклонениям температуры. В качестве источника нативного белка рекомендуется использовать сыворотку большого рогатого скота, лошадиную либо крови (внутренней средой организма человека и животных) должны быть непременно испытаны на пригодность для культивирования менингококка. Проверку создавать со свежевыделенной культурой либо эталонным штаммом менингококка, хранившемся в высушенном состоянии.
Морфологически клеточки менингококков имеют овальную форму и размеры порядка 0,6-1,0 мкм. Величина микробных клеток и их форма могут различаться, что описывает соответствующий для менингококков признак клеточного «полиморфизма». Этот признак в особенности выражен в мазках из новых культур, при всем этом общая морфологическая картина культурального мазка, окрашенного по Граму, имеет вид лежащих хаотично полиморфных (по величине и расцветке) грамотрицательных кокков (эффект «рассыпанного гороха»). Парное размещение менингококков (диплококков) наблюдают в продуктах, приготовленных из жидкостей и органов пораженного организма. В спинномозговой воды менингококки нередко размещаются внутрилейкоцитарно и имеют форму кофейного зерна.
Антигенная структура менингококка сложна и включает капсульный полисахарид, липополисахарид, пили, белки внешной и внутренней мембран клеточной стены. Современными исследовательскими работами показана возможность менингококков без помощи других секретировать в окружающую среду ряд антигенов (к примеру, иммуноглобулин А 1 — протеаза), которые играют ведомую роль в формировании вирулентных параметров менингококков.
Менингококки недвижны, спор не образуют, жгутиков не имеют, являются серьезными аэробами, очень чувствительны к действию наружной среды. При росте на плотных питательных средах образуют маленькие, слегка выпуклые, полупрозрачные колонии с совершенно ровненькими краями. При выдерживании посевов в термостате в течение 2 — 5 дней колонии растут в размере, стают наименее прозрачными и края их получают неровный вид.
Биохимическая активность менингококков невелика и из числа почти всех углеводов они ферментируют лишь глюкозу и мальтозу с образованием кислоты без газа, не разжижают желатин, оксидазоположительны, каталазоположительны.
В согласовании с чертами строения полисахаридной капсулы менингококки подразделяют на 12 серогрупп: А, В, С, X, Y, Z, W-135, 29-Е, К, Н, L, I. Особенное эпидемиологическое инфекции (Термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека). Остальные серогруппы могут вызывать заболевания (нарушения нормальной жизнедеятельности, работоспособности), но почаще выделяются из носоглотки носителей.
Определение серогрупповой свойства менингококков является важной составляющей в системе эпидемиологического надзора за менингококковой заразой. Надлежащие современные систематизации менингококков по разным антигенным системам (белки, липополисахариды, пили и остальные) разрешают определять их популяционные индивидуальности и отбирать более иммуногенные составляющие для конструирования вакцинных препаратов новейшего поколения.
Streptococcus pneumoniae
Возбудителем пневмококковых менингитов является Streptococcus pneumoniae либо пневмококк, который заходит в состав рода Streptococcus (группа стрептококков ротовой полости), включенных в 17-ю группу «Грамположительные кокки».
Это овальные, время от времени вытянутые вдоль оси ланцетовидные кокки, поперечником 0,5 -1,0 мкм, размещаются парами и окружены общей капсулой.
Строение клеточной стены пневмококков приемлимо для грамположительных микробов. Ее основой является пептидогликан со встроенными углеводами, тейхоевыми кислотами, липопротеинами и поверхностными белками. Пневмококки недвижны, спор не образуют, являются факультативными анаэробами, хемоорганотрофы. Для культивирования пневмококки нуждаются в богатых питательных средах, предпочитают капнофильные условия (5 — 10% СО2). Температурный оптимум +37°С. Каталазоотрицательны.
На плотных питательных средах вырастают в виде маленьких, прозрачных, не склонных к слиянию колоний. На средах с кровью (внутренней средой организма) колонии пневмококков окружены зоной б-гемолиза (по систематизации Браун) серовато-зеленого цвета, вследствие разрушения эритроцитов и перевоплощения гемоглобина в метгемоглобин. Колонии склонны к аутолизу, что соединено с активностью внутриклеточных ферментов.
Капсулы пневмококков являются главным фактором вирулентности, защищающим микроорганизм от опсонизации и следующего фагоцитоза. Некапсулированные штаммы авирулентны. Посреди остальных причин патогенности наибольшее
По капсульному антигену проводят типоспецифическую дифференцировку пневмококков, которых насчитывают не наименее 90 серотипов. Серотиповой пейзаж возбудителя зависит от географической области, погодных критерий, возраста нездоровых, вида патологии и со временем может изменяться. Выявление особенностей циркуляции пневмококков дозволяет существенно понизить заболеваемость пневмококковой заразой за счет вакцинопрофилактики групп риска. Остальные возбудители В структуре бактериальных менингитов, вызываемых «иными» возбудителями, можно условно выделить менингиты новорожденных, посттравматические и послеоперационные менингиты, «вторичные» менингиты и менингиты иммунокомпромиссных нездоровых. Менингиты новорожденных, обоснованы возбудителями, входящими в род Streptococcus (S.agalactiae, S.pyogenes и др.), род Listeria (L.monocytogenes), семейство Enterobacteriaceae (Klebsiella spp., Enterobacter spp, E.coli и др.). Инфецирование происходит при прохождении плода по родовым путям либо трансплацентарно. У пациентов, перенесших травмы либо операционные вмешательства, важными этиологическими факторами работоспособности»> работоспособности»>заболевания
Менингиты у лиц с прирожденным либо полученным нарушением функций иммунной системы (томные приобретенные заболевания (нарушения нормальной жизнедеятельности, работоспособности) сердечнососудистой системы, легких, почек, печени, туберкулез, онкологические вирус иммунодефицита человека, вызывающий ВИЧ-инфекцию — работоспособности, последняя стадия которой известна как синдром приобретённого иммунодефицита СПИД) и т.д.) сначала соединены с широким диапазоном грамотрицательных микробов, входящих в семейство Enterobacteriaceae (K.pneumoniae, P.mirabilis, E.coli, Serratia spp.), род Pseudomonas, род Acinetobacter (A.baumanii), дрожжеподобных грибов (род Candida, род Cryptococcus).
«Вторичные» менингиты почаще всего развиваются как отягощения заразных болезней ЛОР-органов, остеомиелита и обоснованы представителями рода Staphylococcus (S.aureus), рода Pseudomonas (P.aeruginosa), семейства Enterobacteriaceae (K.pneumoniae, E.coli и т.д.).
Так именуемые «остальные» возбудители обширно всераспространены во наружной среде и составляют главный диапазон условно-патогенной микрофлоры.
Патогенез гнойного бактериального менингита
Развитие бактериального менингита начинается с момента, когда вирулентные мельчайшие организмы преодолевают защитные барьеры центральной нервной системы, при всем этом сначала в процесс вовлекается субарахноидальное место. Важными резервуарами инфекции (Термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека) ЦНС (центральная нервная система, головной обычно расположенный в головном отделе тела и представляющий собой компактное скопление нервных клеток и их отростков»>мозг) являются назофарингеальные источники. Структурной индивидуальностью ряда возбудителей являются поверхностные образования — пили, которые снабжены сенсорами, определяющими тропную адгезию бактериальной клеточки к слизистой оболочке. Следует также отметить, что такие важные возбудители бактериального менингита, как Str. pneumoniae, N. meningitidis и H. influenzae, снабжены внешной оболочкой из полисахаридов, которая описывает такие причины вирулентности, как невозможность фагоцитоза либо незавершенный фагоцитоз и препятствует комплемент-опосредованному лизису микробов.
Из назофарингеальных источников возбудитель методом локальной пенетрации в ткани (Строение тканей живых организмов изучает наука гистология) может попасть в образованная жидкой соединительной тканью»>кровоток (Кровь — внутренняя среда организма, образованная жидкой соединительной тканью) и потом, преодолев гематоэнцефалический барьер, добиться мозговых оболочек. Бактериемия является важным механизмом распространения инфекции (Термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека) при менингите. Способности защитных сил макроорганизма, направленные на эрадикацию возбудителя из цереброспинальной воды, резко ограничены ввиду начально низкого титра воды и изменение церебрального кровотока (тока внутренней среды организма) в итоге развившегося воспаления. Возникающие нарушения проходимости капилляров в субарахноидальном пространстве приводят к понижению резорбции цереброспинальной воды, результатом же является увеличение внутричерепного давления, падение церебральной перфузии и ауторегуляции. Эти нарушения приводят к стойким неврологическим (относящимся к болезням центральной нервной системы) нарушениям либо к жизнеугрожающим ситуациям.
Микробиологическая смерти) гнойных бактериальных менингитов
Показания к лабораторному исследованию
Лабораторная смерти) гнойных бактериальных менингитов осуществляется бактериологическим способом методом выделения и идентификации возбудителя, серологическим методом выявления специфичных антигенов в жидкостях организма (ликвор, кровь (внутренняя среда организма, образованная жидкой соединительной тканью. Состоит из плазмы и форменных элементов: клеток лейкоцитов и постклеточных структур: эритроцитов и тромбоцитов), синусоидальная жидкость и др.) либо человека и животных). Лабораторное обследование проводят с диагностической целью и по эпидемиологическим свидетельствам. С диагностической целью исследуют нездоровых с клинически выраженной формой заразой.
Бактериологическому обследованию подлежат:
а) в детских учреждениях — малыши, бывшие в разговоре с нездоровыми, и обслуживающий персонал всего учреждения;
б) в школах — учащиеся и педагоги класса, где зарегистрирован нездоровой;
в) в школах-интернатах (круглосуточное пребывание малышей) — учащиеся, общавшиеся с нездоровым в классе и в спальной комнате, также педагоги и воспитатели данного класса;
г) в семьях, квартирах — все лица, общавшиеся с нездоровыми;
д) в ВУЗах, средних учебных заведениях, ПТУ, спецучилищах, институтах при появлении варианта лица, живущие в общежитии.
В детских дошкольных учреждениях бактериологические обследования контактных проводятся не наименее 2-ух раз с интервалом в 3-7 дней, в других коллективах — однократно.
Носители менингококков, выявленные при бактериологическом обследовании в детских дошкольных коллективах, школах-интернатах и др. детских учреждениях выводятся из коллектива на срок проведения санации. Из коллектива взрослых, в том числе учебных заведений, носители не изолируются.
Носители менингококков — малыши и взрослые, выявленные в семейных очагах, в детские дошкольные учреждения, школы, школы-интернаты, санатории, оздоровительные лагеря и др. детские учреждения не допускаются. Бактериологическое обследование обществ, которые посещали эти носители, не проводится.
При выявлении носителя менингококков посреди нездоровых соматических стационаров, его следует изолировать в бокс либо полубокс. вопросец о санации решается зависимо от основного работы на время проведения санации.
Выявленные носители менингококков санируются на дому либо в специально развернутых для этих целей отделениях: взрослые — ампициллином либо левомицетином по 0,5 * 4 раза в денек в течение 4-х дней. Детям эти препараты назначают по той же схеме в возрастных дозах. Для санации носителей в закрытых коллективах взрослых рекомендуется рифампицин по 0,3 через 12 часов в течение 2-х дней.
Через 3 денька опосля окончания курса санации носители, независимо от примененного продукта, подвергаются однократному бактериологическому обследованию и при наличии 1-го отрицательного бактериологического анализа они допускаются в коллективы.
При продолжительном носительстве (выше 1 месяца) и отсутствии воспалительных конфигураций в носоглотке носитель допускается в коллектив, где он был выявлен.
Микробиологическая другими словами заключения о сути заболевания и состоянии пациента»>диагностика (процесс установления диагноза, то есть заключения о сущности болезни и состоянии пациента) гнойных бактериальных менингитов
В связи с тем, что вместе с менингококками, более частыми этиологическими факторами гнойных бактериальных менингитов (ГБМ) могут быть пневмококки, а у малышей младшего возраста Hemophilus influencae и др. возбудители, представляется целесообразным изложение главных дифференциально-диагностических признаков и способов выделения этих микробов.
Идентификация вида N.meningitidis базирована на комплексе морфологических, тинкториальных, культуральных и биохимических признаков.
При первом выделении клеточкам менингококков свойственен полиморфизм, который проявляется в различной величине и разной интенсивности окрашивания микробных клеток. Колонии менингококков на сывороточном агаре тусклы, круглые с ровненьким краем, опалесцирующие, выпуклые, имеют маслянистую густоту, просто снимаются петлей со среды, что различает их от колоний непатогенных нейссерий, имеющих крошащуюся либо тянущуюся густоту.
Некие штаммы, выделенные из СМЖ, могут владеть слабенькой ферментативной активностью в отношении глюкозы либо мальтозы либо обоих углеводов. Большая часть непатогенных видов нейссерий, в отличие от патогенных, способны при выращивании на сывороточном агаре с 5% сахарозы создавать крахмалоподобное вещество (полисахарид), выявляемое при помощи аква раствора Люголя, в виде возникновения бурого окрашивания культуры.
Проведение серологического группирования менингококков является неотклонимым для практических лабораторий, как одна из мер эпидемиологического надзора за менингококковой заразой.
наличие ферментов оксидазы и каталазы присуще всем нейссериям и B.catarrhalis в отличие от гемофилов и пневмококков, что может служить дифференцирующим признаком при их идентификации в сочетании с иными.
Заболевания (нарушения нормальной жизнедеятельности, работоспособности), где этиологическим агентом являются гемофилы, характеризуются воздушно-капельным механизмом передачи, что обеспечивает обширное распространение. Из всех представителей этого рода большей патогенностью владеют H. influenzae, в первый раз описанные Пфейффером в 1892 г. Этот возбудитель является более частым агентом томных генерализованных форм болезней, в особенности у малышей до 5 лет. ГБМ у взрослых могут быть обоснованы иными серологическими типами.
Пневмококки и гемофилы, как и менингококки, являются высоко требовательными к культивированию микробами. В качестве фактора, содействующего их росту употребляют
Для проведения бактериологической диагностики гнойных бактериальных менингитов нужно обеспечить забор материала от нездоровых в полном объеме с соблюдением: сроков забора, доставки патологического материала и критерий транспортировки. В бактериологическую лабораторию доставляется материал в последующем объеме: 1. Ликвор для первичного посева, бактериоскопии и серологических исследовательских работ в количестве не наименее 1,0 мл. 2. Ликвор в 0.1% полужидком агаре (среда «обогащения») для бактериологического скопления культуры, 0,5 мл ликвора засевают в 5,0 мл полужидкого агара немедля у постели хворого. 3. «Толстая капля» крови (внутренней средой организма человека и животных) для бактериоскопии. 4. образованная жидкой соединительной тканью. Состоит из плазмы и форменных элементов: клеток лейкоцитов и постклеточных структур: эритроцитов и тромбоцитов»>кровь
5. образованная водянистой соединительной тканью (Совокупность различных и взаимодействующих тканей образуют органы). Состоит из плазмы и форменных частей: клеток лейкоцитов и постклеточных структур: эритроцитов и тромбоцитов»>тканью. Состоит из плазмы и форменных элементов: клеток лейкоцитов и постклеточных структур: эритроцитов и тромбоцитов) в количестве не наименее 2-х мл для серологических исследовательских работ (РПГА, ВИЭФ, ЛА и др.).
Материал для бактериологических и серологических исследовательских работ доставляется в бактериологическую лабораторию немедля опосля забора в теплом виде (t0=+370С) в специально оборудованных контейнерах.
При невозможности незамедлительной доставки допускается хранение патологического материала в критериях термостата при +370С в течение 18 часов.
Бактериологическое исследование спинномозговой воды хворого
1-й денек исследования
Спинномозговую жидкость (СМЖ) в количестве 2 — 5 мл берут у хворого сходу же при поступлении в стационар (лучше до начала одноклеточнае мельчайшие организмы»>бактерицидной для снятия или устранения симптомов и проявлений заболевания»>терапии (терапия — процесс, для снятия или устранения симптомов и проявлений работоспособности»>заболевания)) с соблюдением все правил асептики. Взятие ликвора делается персоналом в масках.
Первую порцию СМЖ (около 1,0 мл) берут в отдельную пробирку для проведения общего ликворологического исследования. Вторую порцию, созданную для бактериологического исследования наливают в стерильную пробирку (не наименее 1.0 мл) и отчасти засевают в 0,1% полужидкий агар (0,5 мл СМЖ добавляют в 5 мл 0,1% полужидкого агара). Касаться руками краев канюли, иглы и краев пробирок недозволено. Ватно-марлевую пробку полагается держать на весу за ее внешную часть.
СМЖ изучат немедля при доставке в лабораторию. Стерильной пастеровской пипеткой со дна пробирки берут 0,3 — 0,5 мл материала и по 2 — 3 капли засевают на поверхность 2-х чашек Петри с нагретой питательной средой, растирая шпателем. одна чашечка содержит «шоколадный» агар, 2-ая — сывороточный. Посевы ставят в термостат при +370С и делают условия завышенного содержания СО2 в атмосфере термостата. Пробирка с ликвором в полужидком агаре инкубируется в термостате.
Нативная спинномозговая жидкость, оставшаяся в пробирке, исследуется в серологических реакциях и употребляется для изготовления мазков.
Отношение к расцветке по Граму у нейссерий выражено недостаточно верно, потому они окрашиваются метиленовым голубым либо по Граму в модификации Калины. Ровная микроскопия окрашенных мазков спинномозговой воды в известной части случаев дозволяет установить наличие микробов, вызывающих гнойный менингит.
H.influenzae видна в виде маленьких полиморфных грамотрицательных палочек и нитей, окруженных еле приметной ласковой капсулой.
Пневмококки имеют вид ланцетовидных диплококков и маленьких цепочек, образуют капсулу. Они грамположительны, отлично красятся всеми анилиновыми красителями, при всем этом капсула остается неокрашенной и видна лишь на окрашенном фоне.
Результаты бактериоскопии немедля докладывают лечащему доктору в виде подготовительного ответа. При достаточном количестве исследуемого материала рекомендуется 2 — 3 капли засеять в чашечку с питательной средой для определения чувствительности к лекарствам.
2-й денек исследования
Независимо от результатов бактериоскопии ликвора просматривают засеянные чашечки. Просмотр чашек ведут зрительно и при помощи бинокулярного стереоскопического микроскопа, лупы МБС. Во внимание принимают все колонии. Чашечки с отсутствием роста инкубируют одни день. Готовят препараты-мазки, окрашивают, ставят реакцию с 3% веществом КОН и биохимические испытания — на оксидазу, каталазу, уреазу. Гемофилам присущ резкий специфичный цвета, с блестящей поверхностью и ровненькими краями, имеют маслянистую густоту, размерами от 0,1 до 3,0 мм. Менингококки не меняют цвета cреды. На основании микроскопии мазков из колоний и результатов первичных био тестов вероятна выдача подготовительного ответа. Если в мазках обнаружены грамотрицательные кокки, это дает Право отнести их к роду нейссерий и провести дифференциацию видов.
Гемофилы на «шоколадном» агаре дают обильный рост. Колонии сероватого цвета, плоские поперечником 0,2 — 2,0 мм, просто снимаются со среды. В мазках, окрашенных по Граму, видны маленькие недлинные грамотрицательные палочки с капсулой разной степени выраженности, также нити разной длины и недлинные цепочки. На сывороточном агаре H.influenzae не вырастает. Большие 3 — 5 мм колонии, содержащие грамотрицательные палочки, подозрительны на энтеробактерии. Candida и P.aeruginosa вырастают обильно на всех средах, не изменяя цвета «шоколадного» агара.
Колонии пневмококков на обеих средах — маленькие (0,1 — 1,0 мм), время от времени плоские, с вдавлением в центре. На «шоколадном» агаре они окружены зоной желто-зеленого гемолиза (тип б-гемолиза). По наружному виду колонии пневмококков на обеих средах тяжело отличить от колоний стрептококков группы В, зеленящих стрептококков, энтерококков (S.feacalis), которые в редчайших вариантах могут вызывать менингит, в особенности у малышей 1 года.
В мазках из колоний пневмококки имеют овальную либо шаровидную форму, размещаются парами либо в виде маленьких цепочек из 2 — 3 пар. Если имеется обильный рост схожих колоний, то допустим одномоментный отсев на дифференциально-диагностические среды, исследование культуры по ряду признаков и антибиотикочувствительности. Определение чувствительности энтеробактерий и стафилококков проводят на среде АГВ. Эта среда служит основой для определения чувствительности к лекарствам менингококков при добавлении 20% сыворотки. H.influenzae и пневмококков — при добавлении соответственного количества крови (внутренней средой организма человека и животных). Изготовление питательных сред и постановка теста на антибиотикочувствительность делается в согласовании с действующими указаниями.
На этом шаге вероятна выдача окончательного ответа, при положительной реакции со специфичными антисыворотками для H.influenzae, N.meningitidis и Str. pneumoniae.
Колонии, подозрительные на менингококки, отсевают на скошенный сывороточный агар либо сектор чашечки и инкубируют при +370С.
Колонии, подозрительные на пневмококки, стрептококки и др. отсевают на 2 сектора кровяного агара (с 5% крови (внутренней средой организма человека и животных)) для следующего определения чувствительности к желчи и постановки тестов на фармацевтическую чувствительность.
Если число выросших колоний не достаточно (1 — 2), то их отсевают на чашечку с сывороточным либо «шоколадным» агаром для скопления микробной массы, а идентификацию микроорганизма проводят еще через одни день.
При менингитах новорожденных и малышей ранешнего возраста, в также время от времени в остальных возрастных группах, кроме 3-х перечисленных видов микробов этиологическими факторами могут быть энтеробактерии (E.coli, S.marcescens, K.pneumoniae, Salmonella, Citrobacter, Enterobacter), синегнойная палочка (P.aeruginosa), Acinetobacter calcoaceticum, Listeria monocytogenes, разные стрептококки — гемолитические группы В, «зеленящие» и энтерококки, также стафилококки (золотистый и эпидермальный) и грибы рода Candida.
При подозрении на энтеробактерии, синегнойную палочку, стафилококк и Ac.calcoaceticum проводят исследования в согласовании с методическими материалами.
При подозрении на листерии в этот денек, если число колоний дозволяет, ставят ряд проб, также тест на чувствительность к лекарствам. Для L.monocytogenes типично: подвижность при комнатной температуре, разложение мальтозы, глюкозы, инактивность по отношению к дульциту, манниту, сорбиту и арабинозе. Сахароза и глицерин распадаются медлительно. L.monocytogenes образует краевую зону гемолиза на агаре с 5% бараньей крови (внутренней средой организма человека и животных), разлитом слоем 3 мм.
Для идентификации Candida albicans делают посев из подозрительных белоснежных выпуклых колоний, состоящих из дрожжевых клеток, на среду Сабуро либо мясо-пептонный агар, содержащий по 100 МЕ/мл пенициллина и стрептомицина.
Если прямой посев на чашечки с питательной средой не отдал роста колоний, то делается высев на чашечки с сывороточным, «шоколадным» агаром из инкубированной в термостате консистенции ликвора с полужидким агаром (среда «обогащения»).
При отрицательных результатах высев со среды «обогащения» повторяют через 1 — 2 денька в течение 5 дней инкубации в термостате.
При получении роста колоний исследование их проводят этим же методом, что и при прямом посеве спинномозговой воды.
3-й денек исследования
Культуры, отсеянные из отдельных колоний, просматривают под МБС и ставят пробу с 3% веществом КОН.
Для оценки чистоты выросшей культуры готовят мазки и просматривают. При обнаружении морфологически обычных грамотрицательных кокков, проводят идентификацию, серогруппирование идентификационной культуры, также употребляют эту культуру для определения фармацевтической стойкости (если эти испытания не были изготовлены на 2-й денек).
Учитывают результаты посевов, изготовленных на 2-й денек исследования. На этом шаге вероятна выдача окончательного положительного ответа для менингококков и др. микробов (не считая пневмококков и стрептококков).
Для дифференциации пневмококков, зеленящих и фекальных стрептококков (энтерококков) по микроскопии незапятнанных культур на секторах кровяного агара учитывают нрав гемолиза вокруг выросших колоний и ставят доп пробы.
На один из 2-ух секторов кровяного агара с ростом колоний накладывают диск из фильтровальной бумаги, пропитанной 20% веществом желчи (на физиологическом растворе), опосля чего же чашечку помещают при +370С на 1 — 2 часа. По истечении этого времени вокруг диска колонии пневмококков лизируются, образуя зону отсутствия роста шириной 1 — 2 мм, в то время как рост иных стрептококков остается интактным. При положительной пробе чувствительности к желчи, при условии обычной морфологии клеток и колоний, можно отдать положительный ответ о выделении пневмококков. Рост культуры на 2-м секторе кровяного агара употребляют для постановки пробы на чувствительность к фармацевтическим продуктам (если это не было изготовлено преждевременное).
При отрицательных результатах пробы на чувствительность к желчи, рост на 2-м секторе употребляют не только лишь для тесты чувствительности к химиопрепаратам, да и для постановки ряда тестов, дифференцирующих стрептококки.
В тот же денек ставят пробы для идентификации остальных вероятных возбудителей, также тест на фармацевтическую чувствительность (если это не было изготовлено на 2-й денек).
4-й денек исследования
Учитывают результаты посевов с целью дифференциации менингококков от непатогенных нейссерий и Br.catarrhalis и чувствительности к химиопрепаратам (если это не было изготовлено на 3-и день). Вероятна выдача положительного ответа.
Культуру менингококков, выросшую на сывороточном агаре при +370С, можно употреблять для серологической идентификации менингококков в реакции агглютинации либо в реакции преципитации в агаре, также для определения фармацевтической стойкости.
Учитывают результаты проб на фармацевтическую чувствительность и остальные характеристики у остальных возбудителей, выдают окончательный положительный ответ.
Бактериологическое исследование крови (внутренней средой организма человека и животных)
При подозрении на менингококцемию либо сепсис проводят бактериологическое исследование крови (внутренней средой организма человека и животных). В качестве экспресс-метода диагностики рекомендуется изготовление мазка «толстой капли» из крови (внутренней средой организма человека и животных), взятой из вены либо пальца.
В препарате «толстой капли» менингококки имеют в большей степени такую же морфологию, как в спинномозговой воды, но почаще размещаются поодиночке, имеют наиболее круглую форму. В мазке, имеющем голубой фон, отлично видны окрашенные в синий цвет лейкоциты и меж ними огромное количество маленьких, синих, располагающихся кучками, парно и по одному, кокков. Результаты бактериоскопии немедля докладывают лечащему доктору в виде подготовительного ответа.
крови (внутренней средой организма человека и животных) можно посеять в пробирку с 7 — 10 мл полужидкого агара либо 5 — 10 мл крови (внутренней средой организма человека и животных) засеять во флакон с 50 мл среды. Опосля дневной инкубации материал высевают на сывороточный и «шоколадный» агар в чашечки Петри. При наличии роста готовят препараты для микроскопии. При отрицательном итоге рекомендуется идентификацию гемокультур проводят также, как при исследовании спинномозговой воды.
Бактериологическое исследование экссудата из петехий
При менингококцемии время от времени удается найти менингококки конкретно в экссудате дерматологических петехий.
Для этого сначала обтирают кожу вокруг петехий 70% спиртом. В случае образования некроза в центре петехии экссудат можно взять прокаленной и остуженной бактериологической петлей из некротизированных участков. При неповрежденной коже экссудат берут стерильной узкой иглой, соединенной со шприцем, в каком имеется 0,1 — 0,2 мл физиологического раствора. Физиологический раствор вводят в толщу петехии и отсасывают назад.
Посев экссудата создают в чашечки Петри с сывороточным агаром, содержащим лекарства ристомицин либо линкомицин для угнетения дерматологической флоры. Из остатка экссудата готовят препараты-мазки. Мазки из содержимого петехий можно приготовить в виде отпечатков. Для этого стерильной петлей осторожно скарифицируют поверхность петехий, потом прикладывают несколькими местами предметное стекло (стерильное), фиксируют пламенем горелки, окрашивают. На основании данных микроскопии вероятна выдача подготовительного ответа.
Засеянные чашечки инкубируют при +370С 24 часа (в случае отсутствия роста — 48 часов); подозрительные на менингококки колонии отсевают и изучают по описанной схеме (п. 3).
Бактериологическое исследование носоглоточной слизи на менингококк
1-й денек исследования
Исследуемый материал — слизь с задней стены глотки — берут натощак либо через 3 — 4 часа опосля пищи стерильным ватным тампоном, укрепленным на изогнутой проволоке.
Материал берут с неотклонимым надавливанием шпателем на корень языка. Тампон вводят концом наверх за мягкое небо в носоглотку и проводят 2 — 3 раза по задней стене. При извлечении тампон не должен касаться зубов, слизистой щек, языка и язычка.
Материал быть может засеян на месте его взятия на чашечку Петри с питательной средой, либо средой обогащения, либо взят смоченным тампоном, который потом доставляют в лабораторию. При посеве на чашечку материал втирают на поверхности маленького участка (1*2 см) среды всеми сторонами тампона, потом сиим же тампоном засевают штрихами (с отрывом) по всей площади, отведенной для посева.
Употребляют сывороточный агар с добавлением в него лекарств, подавляющих рост грамположительных кокков. Для данной нам цели применяется ристомицин либо линкомицин в хорошей концентрации. На одну чашечку можно засеять две пробы. Но встречаются отдельные штаммы менингококков, наиболее чувствительные к линкомицину, потому те же пробы сразу засевают на одну вторую чашечки с сывороточным агаром без линкомицина.
При отсутствии линкомицина либо ристомицина можно употреблять диски с этими антибиотиками. Диски (не наиболее 2-х) накладывают конкретно на поверхность засеянного сывороточного агара. В этом случае на 1 чашечку сеют лишь одну пробу. Через одни день вокруг диска, в зоне 1 см, рост грамположительной флоры будет подавлен, что наращивает возможность выделения колоний нейссерий.
Засеянные чашечки доставляют в лабораторию, кропотливо защищая их от остывания, в зимнее время используют грелки (+35 — +400С) и немедля помещают в термостат при +370С.
Тампоны с исследуемым материалом, погруженные в полужидкую либо транспортную среду, доставляют в лабораторию, также кропотливо защищенными от остывания. Тампоны в 0,1% полужидком агаре (обогащения) помещают в термостат для подращивания флоры.
Смоченные тампоны либо тампоны в транспортной бульонной среде засевают на чашечку с сывороточным агаром, лишенным ингибитора, без подготовительного подращивания. Посев делают отжатым тампоном. Засеянные чашечки помещают в термостат.
При транспортировке материала на куцее расстояние (1 — 2 часа езды до лаборатории) применение транспортных сред не рекомендуется. При транспортировке в течение 2 — 4 часов уместно применение тампонов, смоченных питательной средой. При транспортировке в течение 3-х часов и наиболее тампоны перевозят, погруженными в транспортную среду.
Полужидкая среда обогащения может употребляться независимо от сроков транспортировки.
2-й денек исследования
Просматривают чашечки, засеянные намедни, зрительно и под лупой-микроскопом МБС, подозрительные колонии отсевают на секторы чашечки с сывороточным агаром (не наименее 3 — 5 колоний). На средах с ингибиторами растут лишь грамотрицательные бактерии, в большей степени представители нейссерий. При отсутствии роста в чашечках с антибиотиками проводят повторный просмотр их через 40 — 48 часов опосля посева. В эти же день делают высев из полужидкой (0,1%) среды обогащения на чашечку с сывороточным агаром без ингибитора.
3-й денек исследования
Изучают рост незапятнанных культур, отсеянных из отдельных колоний в предшествующий денек. Культуры, колонии которых имеют желтоватый пигмент различной интенсивности, также характеризующиеся «сухим» ростом, отбрасывают. Следует подразумевать, что на сывороточном агаре колонии менингококков могут смотреться желтыми из-за колера среды. Потому для обнаружения пигмента их нужно просматривать при дневном освещении.
Для предстоящего исследования на менингококки оставляют лишь непигментированные культуры, дающие ласковый мокроватый рост. Из их готовят мазки, проводят микроскопию незапятанной культуры. В первых генерациях для менингококков свойственны полиморфизм и вариабельность расцветки, что не наблюдается у непатогенных нейссерий. Опосля микроскопии последующую идентификацию культур проводят по выше описанным тестам.
Если рост культуры из отсеянных колоний довольно обильный, то в эти день ставят реакцию агглютинации с группоспецифическими сыворотками.
4-й денек исследования
Просматривают посевы, изготовленные в предшествующий денек. Учитывают результаты роста на бессывороточном и желчном агаре (при +370С), сахаролитическую активность, ставят реакцию с аква веществом Люголя на продукцию полисахарида, проводят окончательную серологическую идентификацию менингококков по реакции агглютинации.
В тот же денек выдают окончательный положительный либо отрицательный ответ. Результаты бактериологического исследования с полужидкой среды, соответственно, будут получены на день позже.
исследование трупного материала
Патологоанатомическое вскрытие лучше проводить в более ранешние сроки опосля погибели. Для бактериологического исследования направляют образованная жидкой соединительной тканью. Состоит из плазмы и форменных элементов: клеток лейкоцитов и постклеточных структур: эритроцитов и тромбоцитов»>кровь (внутренняя среда организма, образованная жидкой соединительной тканью. Состоит из плазмы и форменных элементов: клеток лейкоцитов и постклеточных структур: эритроцитов и тромбоцитов), ликвор, куски головного мозга (центральный отдел нервной системы животных и человека) (либо гной, взятый тампоном с мягенькой мозговой оболочки, в вариантах менингококцемии — из печени, селезенки, легкого, надпочечников и т.д.). крови (внутренней средой организма человека и животных) из больших сосудов.
Ликвор берут стерильной пипеткой из около оболочечного места (во время извлечения мозга из полости черепа), в стерильную пробирку в количестве 3 — 5 мл и немедля высевают на чашечки с питательными средствами. В количестве 0,1 мл исследуемый материал наносят в центр чашечки и распределяют по ее поверхности покачиванием, растирать шпателем не рекомендуется.
нужно подразумевать, что рост на чашечках быть может смешанным из-за попадания непатогенной микрофлоры, потому к принятому набору питательных сред следует добавить чашечку сывороточного агара с антибиотиком (ристомицин, линкомицин).
Гной с мозговых оболочек берут стерильным ватным тампоном и засевают газоном либо штрихами на чашечки с шоколадным сывороточным агаром и в пробирку со средой обогащения, делают 2 мазка на предметных стеклах, один из которых красят метиленовым голубым, иной — по Граму.
Для взятия материала из мозга (центральный отдел нервной системы животных и человека) и остальных органов к месту разреза прикасаются раскаленным шпателем, материал берут из глубины разреза стерильным ватным тампоном. Посев создают обыденным методом на те же плотные и водянистые питательные среды.
Кроме посевов из мозга (центральный отдел нервной системы животных и человека), целенаправлено проводить исследование мазков-отпечатков с поверхности мягеньких мозговых оболочек. Опосля подсушивания и фиксации над пламенем горелки (при продолжительном хранении — в ацетоне) мазки окрашивают и просматривают.