Учебная работа. Гепатопротекторные свойства флавоноидов

Учебная работа. Гепатопротекторные свойства флавоноидов

5

АВТОРЕФЕРАТ

ДИССЕРТАЦИИ НА СОИСКАНИЕ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ

ДОКТОРА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК

ГЕПАТОПРОТЕКТОРНЫЕ СВОЙСТВА ФЛАВОНОИДОВ

(фармакодинамика и перспективы клинического исследования)

14.03.06 — ФАРМАКОЛОГИЯ, КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ

На правах рукописи

ДОРКИНА ЕЛЕНА ГРИГОРЬЕВНА

Волгоград 2010

Работа выполнена в Муниципальном образовательном учреждении высшего проф образования «Пятигорская муниципальная лекарственная академия Федерального агентства по здравоохранению и соц развитию» и в Муниципальном образовательном учреждении высшего проф образования «Волгоградский муниципальный мед институт Федерального агентства по здравоохранению и соц развитию»

Научный эксперт: доктор мед наук,

доктор Тюренков Иван Николаевич

Официальные оппоненты:

доктор био наук, доктор Дудченко Галина Петровна

2. доктор био наук, доктор Гарибова Таисия Левоновна

3. доктор мед наук, Макляков Юрий Степанович

Ведущая организация:

ГОУ ВПО «Саратовский муниципальный мед институт Росздрава»

защита состоится «__»_________2010 г. в____ч. на заседании Диссертационного Совета Д 208.008.02 ГОУ ВПО «Волгоградский муниципальный мед институт Росздрава» (400131, г. Волгоград, пл. Павших бойцов,1)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Волгоградский муниципальный мед институт Росздрава»

Автореферат разослан » » 2010 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета,

доктор А.Р. Бабаева

Актуальность задачи

Поражения печени различной этиологии являются довольно обширно всераспространенной патологией [Дробинский А. и соавт., 2002; Ильченко Л.Ю. и соавт., 2002, Полонский В.М., 2005. По данным ВОЗ в мире — 2 миллиардов человек с патологией печени, что в 100 раз превосходит распространенность ВИЧ (вирус иммунодефицита человека, вызывающий ВИЧ-инфекцию — социально полезной деятельности»>заболевание, последняя стадия которой известна как синдром приобретённого иммунодефицита СПИД)—инфекции (Термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека) [Дроговоз С.М., 2009]. Посреди широкого круга препаратов, применяемых в всеохватывающей для снятия либо устранения симптомов и проявлений иной этиологии) огромное физиологии (Физиология от греч. — природа и греч. — знание — наука о сущности живого), сначала, наблюдается сдвиг про-антиоксидантного равновесия в сторону усиления прооксидантной составляющей, понижение резервов мобилизации антиоксидантной защиты, что связано с нарушением энергообеспечения клеточки, детоксикационных устройств, активацией апоптоза, провоспалительных цитокинов и др. [Дубинина Е.Е., 1998, Болдырев А.А., 2001, Шаповал Г.С. и др., 2003, Сазонтова Т.Г. и др., 2007, Ланкин В.З. и др., 2009, Han D. Et all., 2006]. Окислительный физическое либо психологическое инициирует нарушения, связанные с кровоснабжением печени (повреждение эндотелия сосудов и синусоидов печени с конфигурацией выработки оксида азота, ухудшение реологических параметров крови (внутренней средой организма человека и животных), состояния микроциркуляторного русла и пр), что ухудшает течение патологического процесса [Марков Х.М., 2005, Lukivskaya O. et al., 2004, P?rvu A. E. et al., 2005, Bab?l P. et al., 2006].

Многофакторность патогенеза поражений печени просит, чтоб и защита осуществлялась на разных уровнях и структурах, что описывает перспективность поиска новейших гепатопротекторов посреди флавоноидов, для которых выявлено наиболее 40 видов фармакологической активности [Robak J. et al., 1996]. Невзирая на существенное число работ, посвященных исследованию гепатозащитных параметров флавоноидов, сравнительного исследования эффективности их деяния не проводилось. Не выяснены до конца и механизмы их гепатопротекторной активности. Большая часть исследователей считают, что основой такого является антиоксидантное действие [Чучалин В.С., 2003, Куркин В.А., 2003, Саратиков А.С. и др., 2005, Middleton E. JR. et al., 1996, 2000, Roback I. et al., 1996, Narayana et al., 2001, Nijveldt R.I. et al., 2001, Havsteen B. H., 2002]. В крайние годы все большее внимание уделяется исследованию состояния эндогенных систем антиоксидантной защиты [Puiggros F. et al., 2005, Moskaug et al., 2005, Кравченко Л.В. и др., 2005, Frei B., 2003].

Потому сейчас животрепещущим является не только лишь поиск новейших действенных и неопасных гепатозащитных препаратов, да и сравнительное исследование особенностей и интимных устройств деяния уже узнаваемых гепатопротекторов.

Исходя из этого, следует считать принципиальным, как с научной, так и с практической точки зрения, всеохватывающее, сравнительное исследование гепатопротекторного деяния флавоноидов, их воздействие на про-антиоксидантный баланс, системы антиоксидантной защиты, детоксикации и энергообеспечения, эндотелиальную дисфункцию, продукцию оксида азота и печеночный образованная водянистой соединительной тканью (Совокупность различных и взаимодействующих тканей образуют органы)«> образованная жидкой соединительной тканью»>кровоток (Кровь — внутренняя среда организма, образованная жидкой соединительной тканью), что и явилось предметом истинной работы.

Цель и задачки работы
На основании всеохватывающей и сравнительной оценки воздействия флавоноидов на главные метаболические и гемодинамические патогенетические процессы при токсических поражениях печени экспериментально доказать создание новейших действенных российских гепатопротекторов.
Для заслуги данной нам цели были поставлены последующие задачки:
провести исследование в сравнительном нюансе воздействия лечебно-профилактического деяния гесперидина, диосмина, флавицина, кверцетина, карсила и сухого экстракта (СЭ) из горошка обрубленного (Vicia abbreviate Fish. ex Spreng. (Vicia truncatula Fish. ex. Bieb), содержащего флавицин, на развитие синдромов цитолиза, холестаза, мезенхимального воспаления и гепатодепрессии, гистологическую картину печени, интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ), состояние систем антиоксидантной защиты (АОЗ), энергообеспечения и детоксикации при экспериментальном остром поражении печени СС14 и этанолом;
провести сравнительное исследование антиоксидантного деяния исследуемых флавоноидов in vitro и их воздействия на интенсивность ПОЛ, состояние систем АОЗ, энергообеспечения и детоксикации in vivo при их курсовом внедрении в критериях нормы;
провести сравнительное исследование воздействия флавоноидов на содержание NO у интактных звериных и при его лишней продукции, индуцированной СС14, способом ЭПР;
изучить в сравнительном нюансе воздействие флавоноидов на органный тканью. Состоит из плазмы и форменных элементов: клеток лейкоцитов и постклеточных структур: эритроцитов и тромбоцитов) — внутренняя среда организма и функцию эндотелия в критериях нормы и моделирования эндотелиальной нефункциональности;
провести всеохватывающее исследование энергетического обмена, интенсивности ПОЛ и состояния АОЗ, также конфигурации печеночных характеристик и гистоморфологической картины данного органа в процессе приобретенной алкоголизации и при целебном применении более активного гепатопротектора в сопоставлении с карсилом;
изучить воздействие более активного гепатопротектора на развитие фиброза при приобретенном поражении печени СС14, желчеобразовательную функцию печени в норме и при экспериментальном гепатите и отдаленные результаты его исцеления.
Научная новизна приобретенных результатов
В первый раз проведено сравнительное, всеохватывающее исследование устройств гепатопротекторного деяния личных флавоноидов, флавицина и СЭ из травки горошка обрубленного, их воздействие на процессы ПОЛ, системы АОЗ, детоксикации и энергообмена в критериях нормы и патологии печени. В первый раз установлена гепатозащитная активность флавицина, выделенного из необычного растительного сырья (надземная часть V. abbreviata), при токсических поражениях печени СС14 и этанолом. В первый раз показано существование тесноватой корреляционной связи меж выраженностью гепатозащитного деяния и степенью восстановления про-антиоксидантного равновесия за счет не только лишь прямого антиоксидантного деяния флавоноидов, да и увеличения активности эндогенной системы АОЗ в печени.
В первый раз выявлено, что курсовое введение исследуемых флавоноидов оказывает стимулирующее воздействие на активность NADP+-редуктазных ферментов, принимающих роль в регенерации восстановленного глутатиона, а применение диосмина, флавицина и кверцетина увеличивает содержание GSH, участвующего в механизмах увеличения неспецифической резистентности организма к экстремальным факторам среды.
В первый раз показано, что введение гесперидина и флавицина наращивает печеночный образованная водянистой соединительной тканью (Совокупность различных и взаимодействующих тканей образуют органы)«>тканью) в критериях нормы. В первый раз проведено сравнительное исследование корригирующего воздействия флавоноидов на органный образованная водянистой соединительной тканью (Совокупность различных и взаимодействующих тканей образуют органы)«> образованная жидкой соединительной тканью»>кровоток (Кровь — внутренняя среда организма, образованная жидкой соединительной тканью) в критериях эндотелиальной нефункциональности, разумеется связанное с активацией eNOS и увеличением продукции NO.
Способом ЭПР показано увеличение под воздействием флавоноидов содержания NO в норме, и его понижение в критериях индукции окислительного стресса введением СС14, что свидетельствует о их модулирующем воздействии на продукцию NO.
В первый раз установлено, что СЭ из Vicia abbreviata, содержащий 5,12 — 5,67% флавицина, владеет наиболее действенным гепатопротекторным действием, чем продукт сопоставления карсил, и исследован механизм деяния СЭ при профилактическом и целебном применении, который связан с преодолением окислительного стресса за счет поддержания функционирования эндогенной системы АОЗ, нормализации энергопродукции и действий детоксикации, торможением процесса фиброгенеза при приобретенной патологии, восстановлением желчеобразовательной функции печени.
В первый раз показано, что в процессе приобретенной алкоголизации происходит усиление адаптационно-защитных устройств в виде увеличения активности ферментов NADPH-GSH-зависимой системы, что существенно наиболее выражено при целебном применении СЭ из Vicia abbreviate.
Практическая значимость
На основании приобретенных результатов выявлено в разной степени выраженное воздействие флавоноидов на патологические движение — совокупа симптомов с общим патогенезом»>синдромы (синдром др.-греч. — стечение, скопление; — бег, движение — совокупность симптомов с общим патогенезом), патогенетические механизмы поражения гепатоцитов: ПОЛ, систему АОЗ, детоксикации и энергообразования, кровоснабжение печени, эндотелиальную дисфункцию. Такие данные разрешают создать советы по дифференцированному применению флавоноидов, как гепатопротекторов, при определенном нраве течения средства для исцеления поражений печени. СЭ из V. abbreviata, оказывающий выраженное гепатозащитное действие при острых и приобретенных токсических поражениях печени, превосходящее карсил, также препятствующий развитию фиброза и стимулирующий секрецию желчи, быть может применен для сотворения фармацевтического продукта.
Практические советы
Беря во внимание селективную токсичность ряда фармацевтических средств по отношению к эндотелиальным клеточкам синусоидов печени и более выраженное положительное действие гесперидина на эндотелиальную функцию и печеночный тканью. Состоит из плазмы и форменных элементов: клеток лейкоцитов и постклеточных структур: эритроцитов и тромбоцитов) — внутренняя среда организма, данное соединение быть может рекомендовано для корректировки сосудистых поражений печени. Наиболее действенное нормализующее воздействие диосмина на холестаз быть может основанием для его советы при заболеваниях печени, сопровождающихся нарушением желчеобразования. Кверцетин быть может рекомендован при поражениях печени, сопровождающихся выраженным цитолизом и мезенхимальным воспалением. Флавицин и СЭ, являющиеся высокоэффективными гепатопротекторами при поражениях печени СС14 и алкоголем, могут быть рекомендованы для разработки на их базе фармацевтических средств для исцеления и профилактики болезней печени при острых и приобретенных отравлениях гепатотоксическими ядовитыми веществами.
Уровень внедрения результатов исследования
По данным, приобретенным создателем, подготовлены информационные письма, материалы которых включены в планы НИР кафедр технологии фармацевтических средств (акт внедрения от 03.09.2007 г), органической химии (акты внедрения от 07.09.2007г. и от 04.11.2009), фармакогнозии (акт внедрения от 03.11 2009), фармакологии (акт внедрения от 29.08.2007 г) и ботаники (акт внедрения от 10.11.2009) Пятигорской ГФА Росздрава. Материалы, приобретенные создателем, употребляются в санаторно-курортной практике (санаторий им.М.Ю. Лермонтова, г. Пятигорск, акт внедрения от 20.08.2007). Результаты работы включены в лекционный материал для студентов целебного, педиатрического, лекарственного, слушателей факультета усовершенствования докторов и провизоров на кафедрах фармакологии, фармакологии и биофармации ФУВ ВолГМУ, Курского муниципального мед института, Ставропольской гос мед академии, Саратовского муниципального мед института. Данные по исследованию механизма деяния и гепатозащитной активности сухого экстракта из горошка обрубленного вошли в набор документов, переданных в ООО «Эвалар» для представления в ФК МЗ и СР на получение разрешения к проведению клинических испытаний.
Связь с планом НИР ГОУ ВПО «Пятигорская ГФА Росздрава»
Диссертационная работа выполнена в согласовании с планом научно-исследовательских работ ГОУ ВПО «Пятигорская ГФА Росздрава» по дилемме «исследование биохимических основ защитного деяния флавоноидов при экспериментальном поражении печени» (номер гос регистрации 01.200.11.7645), также в согласовании с планом научно-исследовательских работ Волгоградского Муниципального мед института и соответствует дилемме, номер гос регистрации 01 200 800 804.
Апробация приобретенных результатов
Главные положения диссертационной работы изложены на 55-й — 63-ей научных конференциях «Разработка, исследование и маркетинг новейшей лекарственной продукции» (Пятигорск, 2000-2008 гг.), на десятой Русской конференции «Гепатология сейчас» (Москва, 2005 г), на интернациональной конференции «Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека» (Смоленск, 2005 г), на IV конференции гастроэнтерологов Южного Федерального окрестность (Кисловодск, 2005г), на интернациональной научной конференции «Молекулярные, мембранные и клеточные базы функционирования биосистем» (Минск, 2006 г), на IX Украинском биохимическом съезде (Харьков, 2006 г).
Положения, выносимые на защиту
1. При острых поражениях печени СС14 и этанолом наиболее выраженной гепатозащитной активностью в сопоставлении с персональными флавоноидами и карсилом, владеет СЭ из V. abbreviate (truncatula), который фактически вполне избавляет развитие синдромов цитолиза, холестаза, мезенхимального воспаления и печеночной дефицитности, белковую и жировую дистрофии, также в основном восстанавливает про-антиоксидантное равновесие, энергетический обмен и активность систем детоксикации при лечебно-профилактическом внедрении в дозе 300 мг/кг.
2. В критериях развития окислительного стресса при острых токсических поражениях печени СС14 и этанолом выявлено в различной степени выраженное воздействие флавоноидов и СЭ на ферментативное звено системы АОЗ и сопряженные механизмы клеточной защиты (энергообмен и детоксикацию).
3. Флавицин in vitro по силе антиоксидантного деяния уступает кверцетину, но наиболее массивно активирует АОЗ и превосходит кверцетин по эффективности гепатопротекции и поддержанию равновесия в системе ПОЛ/АОС. Отмечается довольно тесноватая корреляционная связь меж выраженностью гепатопротекции и коэффициентом окислительного стресса, характеризующим про-антиоксидантный баланс. Отсюда следует, что наиболее принципиальное причин.
6. Исследуемые флавоноиды в норме и при эндотелиальной нефункциональности наращивают продукцию NO, возможно, методом активации eNOS, и увеличивают печеночный тканью. Состоит из плазмы и форменных элементов: клеток лейкоцитов и постклеточных структур: эритроцитов и тромбоцитов) — внутренняя среда организма, также ограничивают гиперпродукцию NO iNOS в печени, стимулированную СС14, что в определенной степени обусловливает гепатопротективные характеристики флавоноидов.
7. СЭ в дозе 300 мг/кг при целебном применении на модели приобретенного СС14-гепатита уменьшает развитие фиброза, также улучшает желчеобразовательную функцию печени в норме и при патологии печени.
8. Высочайшая эффективность СЭ, сплетенная с действием на главные звенья патогенеза острых и приобретенных поражений печени, наличие у него наиболее выраженного целебного деяния, чем у карсила, дозволяет советовать СЭ в качестве субстанции для сотворения новейшего гепатопротекторного продукта.
Публикации
По теме диссертации размещено 42 печатных работы из их 9 статей в научных журнальчиках, которые входят в список рекомендованных ВАК РФ (Российская Федерация — структура и объём диссертации
Диссертационная работа изложена на 351 страничках текста компьютерного набора и состоит из введения, обзора литературы, материалов и способов исследования, результатов собственных исследовательских работ (8 глав), заключения, общих выводов, перечня литературы, приложений А, Б и В (55 страничек). Работа иллюстрирована 31 таблицей и 89 рисунками. Библиографический перечень включает 649 источников, из которых 416 публикации зарубежных создателей.
Материалы и способы исследования
В качестве объектов исследования служили личные флавоноиды: кверцетин (конторы Merk), диосмин, гесперидин, выделенные из растительного сырья (Vicia tanuifolia (variabilis) Roth. и кожицы цитрусовых), сумма, содержащая арабиноглюкозид — и ксилоглюкозид диосметина, которая условно названа флавицином и СЭ, приобретенные из надземной части горошка обрубленного — Vicia abbreviate Fish. ex Spreng. (Vicia truncatula Fich. ex Bieb), сем. бобовых — Fabaceae на кафедре органической химии ГОУ ВПО «Пятигорской ГФА Росздрава» под управлением доктора лекарственных наук, доктора Э.Т. Оганесяна. При помощи физико-химических способов анализа: температуры плавления, УФ (Ультрафиолетовое излучение — электромагнитное излучение, занимающее диапазон между фиолетовой границей видимого излучения и рентгеновским излучением)-, ИК (то есть тепловое, инфракрасное, на основе инфракрасного излучения) — и ПМР — спектроскопии, тонкослойной (ТСХ) и картонной (БХ) хроматографии, пробы смешения, доказано строение выделенных веществ [Хочава М.Р., 2001, Шаренко О.М., 2005]. СЭ представляет собой порошок темно-коричневого цвета с приятным специфичным запахом, содержащий 5,12 — 5,67% флавицина [Шаренко О.М., 2005]. Для стандартизации предложен способ количественного спектрофотометрического определения суммы флавоноидов в сухом извлечении при 410 нм, ошибка которого находится в границах 3,09-3,55%. В качестве продукта сопоставления употребляли карсил.
Опыты проведены на 1050 белоснежных беспородных и полосы Wistar половозрелых крысах обоего пола массой 170-240 г. (по 10-12 звериных контрольных групп и 6-8 опытнейших групп) и 80 белоснежных мышах обоего пола массой 25-30 г. (по 10 мышей в группе). Звериные содержались в критериях вивария Пят ГФА, Волгоградского муниципального мед института и муниципального учреждения «Русского кардиологического научно-производственного комплекса Минздрава РФ (Российская Федерация — денек 50% раствора CCl4 в вазелиновом масле в дозе 0,15 мл/100 г массы тела звериного. Гесперидин, диосмин, флавицин, кверцетин изучили в спектре доз 25, 50, 100 и 200 мг/кг, СЭ — 100, 200, 300 и 500 мг/кг при пероральном внедрении в виде аква суспензии по лечебно-профилактической схеме: в течение 7 дней до CCl4, а потом на фоне проигрывания модели (5 дней). Исследуемые флавоноиды и СЭ вводили раз в день в одно и то же время до кормления звериных за 1 час до введения гепатотоксина. Установленные действенные дозы были выбраны для последующих исследовательских работ и составили для личных веществ — 100 мг/кг (наименее 1/60 от LD50), для СЭ — 300 мг/кг (наименее 1/20 от LD50). Карсил изучали в дозе 100мг/кг.
Острое поражение печени этанолом воспроизводили курсовой алкоголизацией крыс-самок путём 2-х кратной внутрибрюшинной инъекции 33% раствора этанола в день в дозе 0,75 мл/100г массы тела звериного в течение 7 дней [Спрыгин В.Г., Кушнерова Н.Ф., 2002]. Исследуемые флавоноиды, СЭ и карсил звериным вводили в действенных дозах за 5 дней до введения этанола, а потом вместе с ним (7 дней).
Курсовое поение здоровых звериных флавоноидами, СЭ и карсилом производили в течение 12 дней в действенных гепатопротекторных дозах.
Приобретенную алкоголизацию проводили методом перорального введения 40% этилового спирта в дозе 14 мл/кг [Мансурова И.Д., 1985] в течение 60 дней. Целебное действие СЭ изучали в дозе 300 мг/кг в сопоставлении с карсилом в дозе 100 мг/кг. Через день опосля 60-дневной алкоголизации (начальный контроль), через 7, 14 и 21 денек целебного внедрения СЭ и карсила проводили забой звериных опытнейших и соответственных контрольных групп. Контролем служили звериные, которые продолжали получать лишь 40% этанол в дозе 14 мл/кг также 7, 14 и 21 денек.
Оценку эффективности гепатозащитного деяния проводили по степени нормализации биохимических характеристик главных патологических синдромов, наблюдающихся при поражениях печени: цитолиза — активности в сыворотке АлАт, АсАт, КФ, ФЛА2, ГДГ, соотношению АсАт/АлАт; холестаза — активности в сыворотке крови (внутренней средой организма человека и животных) ЩФ, -ГТП, содержанию билирубина и его фракций (прямого и непрямого билирубина), мезенхимального воспаления — определение белковых фракций, соотношения альбумины/глобулины и тимоловой пробы в сыворотке крови (внутренней средой организма человека и животных); печеночно-клеточной дефицитности, характеризуя состояние белково-синтетической и метаболической функций печени по показателям белкового (содержание общего белка, альбуминовой фракции и активности ХЭ, содержанию мочевины в сыворотке крови (внутренней средой организма человека и животных)), углеводного (содержание глюкозы в крови (внутренней средой организма человека и животных) и гликогена в печени) и липидного (содержание растворим в жирах и органических растворителях. «>крови (внутренней средой организма человека и животных), содержание ТРГ и ФЛ в печени) обменов. В качестве маркеров хронизации патологического процесса в печени определяли составляющие соединительной ткани (Строение тканей живых организмов изучает наука гистология): содержание в печени общего оксипролина (ОП) и содержание гликозаминогликанов (ГАГ) в сыворотке крови (внутренней средой организма человека и животных). Не считая этого, изучали гистоморфологическую картину органа при расцветке препаратов гематоксилином и эозином, пикрофуксином по Ван-Гизону для выявления компонент соединительной ткани (Строение тканей живых организмов изучает наука гистология) и суданом III для выявления липидов. Микрофотосъемку гистологических препаратов производили на микроскопе MICROS AUSTRIA (Австрия) цифровой фотокамерой «Olympus» (Япония). О эффективности гепатозащитного деяния судили также по смерти звериных контрольных групп и звериных, получавших гепатопротекторы.
Для сопоставления эффективности гепатозащитного деяния исследуемых флавоноидов, СЭ и карсила рассчитывали процент гепатопротекции по изученным биохимическим показателям в отдельности и в целом с учетом всех характеристик по формуле: х 100%, где Н — коэффициент гепатопротекции, О — больше величина данного аспекта приближалась к 100%, тем наиболее действенным числилось гепатозащитное действие.
Интенсивность ПОЛ изучали по содержанию ТБК-активных товаров в печени и сыворотке крови (внутренней средой организма человека и животных), диеновых конъюгатов (ДК) в печени, интенсивности спонтанного и Fe2+-аскорбатиндуцированного ПОЛ в постъядерной фракции печени (ПФП). Оценку антиоксидантной системы (АОС) проводили путём определения активности в ПФП каталазы, супероксиддисмутазы (СОД), глутатион-S-трансферазы (Г-S-Т), глутатионредуктазы (ГР), глутатионпероксидазы (ГП): общей, Se-зависимой и Se-независимой, НАДФ+-редуктазы при использовании в качестве субстратов малата (МДГ), глюкозо-6-фосфата (Г-6-ФДГ) и изоцитрата (ИЦДГ), содержанию глутатиона восстановленного (GSH) в печени, по общей антиокислительной активности (АОА) сыворотки крови (внутренней средой организма человека и животных) и резистентности эритроцитов к спонтанному гемолизу. Для количественной оценки дисбаланса в системе ПОЛ/АОС рассчитывали коэффициент окислительного стресса как отношение произведения характеристик ПОЛ к произведению характеристик АОС, выраженных в относительных единицах к норме [Давыдов Б.В., 1991], принимая, что при сохранении баланса в системе ПОЛ/АОС коэффициент (К) = 1.
состояние энергообмена изучали по содержанию глюкозы, гликогена, пирувата, лактата, АТФ в печени и активности сукцинатдегидрогеназы (СДГ), цитохром-с-оксидазы (ЦТО) и Mg 2+ — АТФ-азы в митохондриальной фракции печени. Антитоксическую функцию печени оценивали, измеряя активности ферментов метаболической трансформации ксенобиотиков — НАДН: K3 [Fe (CN) 6] -редуктазы, НАДФН: неотетразолий (НТ) — редуктазы, N-деметилазы, n-гидроксилазы в микросомальной фракции печени.
исследование антиоксидантного деяния гесперидина, диосмина, флавицина и кверцетина in vitro проведено на модели Fe2+_индуцированного ПОЛ в липосомальной системе, приобретенной на базе фосфатидилхолина.
исследование воздействия флавоноидов на содержание радикалов NO в печени и в организме в целом проводили способом ЭПР при использовании Fe3+ДЭТК2 и Fe3+МГД2 в качестве ловушек в норме и опосля индукции ПОЛ CCl4.
исследование воздействия гесперидина и флавицина на печеночный образованная водянистой соединительной тканью (Совокупность различных и взаимодействующих тканей образуют органы)«>тканью) проведено в норме при их пероральном внедрении в дозе 100 мг/кг и в критериях стимуляции ацетилхолином (0,01 мг/кг) и блокады нитро-L-аргинином (10 мг/кг) синтеза эндогенного оксида азота при внедрении анализаторов и флавоноидов (30 мг/кг) в левую бедренную вену.
Эндотелийпротективное действие гесперидина, диосмина, флавицина и кверцетина исследовано в критериях моделирования нефункциональности эндотелия в итоге экстирпации матки с придатками у крыс-самок, вызывающей дефицитность половых гормонов. Исследуемые вещества вводили перорально в течение 4-хнедель опосля кастрации в дозе 100 мг/кг. Продуктам сопоставления служил сулодексид с доказанной эндотелиопротективной активностью в дозе 30 ЕВЛ/кг (единицы высвобождения липопротеидлипазы). О воздействии флавоноидов на эндотелиальную дисфункцию судили по реакции сосудов на введение ацетилхолина (0,01 мг/кг), L-аргинина (100 мг/кг), нитро — L-аргинина (10 мг/кг) и нитроглицерина (0,007 мг/кг), и определяли скорость формирования тромба в сосудах по времени тромбообразования, вызванного аппликацией на стену общей сонной кровотока (тока внутренней среды организма) производилось на за ранее наркотизированных этаминал-натрием (40 мг/кг) крысах при помощи ультразвукового допплерографа, датчика УЗОП-010-01 (рабочая частота 25МГц) и компьютерной программкой ММ-Д-КMinimax Doppler v.1.7 (Санкт-Петербург, Наша родина).
Определение вязкости крови (внутренней средой организма человека и животных), агрегации тромбоцитов, индуцированной АДФ (5 мкМ) и индекс агрегации эритроцитов проводили с внедрением реологических способов с применением регистрирующей аппаратуры: анализатор крови (внутренней средой организма человека и животных) реологический (АРп-01, Наша родина), двухканальный лазерный анализатор агрегации (НПФ «Биола» LA-230-2, Наша родина), лазерный коагулометр («Минилаб-701», Наша родина).
Антифибротическое действие СЭ изучили на модели приобретенного поражения печени СС14 (пероральное введение 50% масляного раствора СС14 9 раз, два раза в недельку в дозе 2,0 мл/кг массы тела) при его целебном применении в дозе 300 мг/кг в сопоставлении с карсилом в дозе 100 мг/кг по измерению биохимических маркеров соединительной ткани (Строение тканей живых организмов изучает наука гистология) (ОП и ГАГ) и обнаружению ее частей на гистологических продуктах печени через 7, 14 и 21 денек исцеления. Отдаленные результаты исцеления были исследованы через 2 месяца опосля 21-дневного курса исцеления.
Для оценки желчеобразовательной функции печени СЭ вводили в дозе 300 мг/кг 12 дней здоровым звериным, также на фоне острого поражения печени СС14: 50% масляный раствор СС14 вводили подкожно в дозе 0,4 мл/100 г массы тела, 1 раз в день, 4 денька. Определяли размер и состав (содержание желчных кислот — ЖК и работы
1. Сравнительное исследование эффективности гепатозащитного деяния флавоноидов, СЭ из V. abbreviate (truncatula) и их воздействия на развитие окислительного стресса в критериях острого поражения печени тетрахлорметаном.
Тетрахлорметан является более известным гепатотоксином, используемым для моделирования болезней печени. Он подвергается микросомальному окислению при участии цитохрома Р450 с образованием электрофильных алкилирующих интермедиатов и вольных радикалов, способных индуцировать ПОЛ и видоизменять биомолекулы в итоге ковалентного связывания с ними. Как установлено в наших исследовательских работах, в итоге введения СС14 наблюдался сдвиг про-антиоксидантного равновесия в сторону усиления ПОЛ (увеличение содержания ТБК-продуктов и ДК, интенсивности Fe2+-аскорбатиндуцированного ПОЛ ПФП) с истощением АОЗ (падение активностей СОД, каталазы, ГП, Г-S-Т, НАДФ+-редуктаз, содержания GSH, АОА сыворотки крови (внутренней средой организма человека и животных)), развитие гипоксического состояния с усилением анаэробного гликолиза и нарушением аэробной продукции энергии на уровне митохондрий (увеличение соотношения лактат/пируват, понижение содержания глюкозы и гликогена в печени, понижение активности СДГ, ЦТО и увеличение Мg2+-АТФазы), подавление реакций микросомального окисления (понижение активностей N -деметилазы, n-гидроксилазы, НАДФН — НТ-редуктазы). Это сопровождалось развитием томного поражения печени с проявлениями синдромов цитолиза (увеличение активности ФЛА2, КФ, АлАт, АсАт и соотношения АсАт/АлАт), холестаза (увеличение активности ЩФ, -ГТП, содержания общего билирубина, в особенности фракции прямого билирубина), мезенхимального воспаления (диспротеинемия с повышением глобулиновой фракции белков сыворотки крови (внутренней средой организма человека и животных) и увеличение тимоловой пробы), жировой дистрофии (повышение количества ТРГ при понижении ФЛ в печени) и печеночно-клеточной дефицитности (уменьшение общего белка и в особенности альбуминов в крови (внутренней средой организма человека и животных), понижение активности ХЭ, увеличение фракции прямого билирубина в крови (внутренней средой организма человека и животных) и содержания мочевины). На гистоморфологической картине также обнаруживались конфигурации, соответствующие для поражения печени ССl4: жировая и белковая дистрофия, очаги некроза, локализованные в большей степени в центральной зоне печеночной дольки, признаки воспалительной реакции (инфильтрация мононуклеарами), нарушения кровообращения (Кровообращение — важный фактор в жизнедеятельности организма человека и ряда животных) в микрососудах (агрегация эритроцитов, стазы крови (внутренней средой организма человека и животных)), поражения эндотелия синусоидов. На основании приобретенных данных можно гласить, что при внедрении крысам тетрахлорметана в печени развивался острый токсический активный гепатит с очаговой жировой дистрофией гепатоцитов (гепатитогепатоз). количество погибших звериных в данной нам группе составило 62,5%.
Лечебно-профилактическое применение флавоноидов, СЭ и карсила в действенных дозах на фоне острого CCl4-гепатитогепатоза в разной степени влияло на восстановление биохимических характеристик главных патологических синдромов поражения печени СС14, что отражает таблица 1, в какой знаком «+» обозначена полная нормализация показателя, отнесенного к тому либо иному синдрому, «±» — неполная нормализация и «-» — отсутствие эффекта (показатель достоверно не различается от такого у звериных с патологией), также указаны средние проценты гепатопротекции по синдромам. Видно, что в отношении устранения синдрома цитолиза флавицин, кверцетин и карсил показали наиболее выраженное действие, чем гесперидин и диосмин. Но флавицин, диосмин и гесперидин превосходили кверцетин и карсил по воздействию на развитие холестаза. Активацию мезенхимы кверцетин и карсил предупреждали наиболее отлично, чем флавицин, диосмин и гесперидин. Но флавицин и диосмин превосходили действие кверцетина, гесперидина и карсила по воздействию на развитие синдрома печеночно-клеточной дефицитности. СЭ фактически вполне восстановил все изученные характеристики.
Для количественной сравнительной оценки эффективности гепатозащитного деяния флавоноидов, СЭ и карсила в целом были рассчитаны средние значения коэффициентов гепатопротекции с учетом всех биохимических характеристик. Исходя из среднего процента гепатозащитной активности, большей эффективностью в критериях СС14-гепатитогепатоза владеют флавицин (92%) и сухой экстракт (95%), что достоверно превосходит действие карсила (61%) в 1,5-1, 6 раза и кверцетина (77%) в 1, 2 раза, и подтверждается процентом выживших звериных, составившим для флавицина, диосмина и сухого экстракта 100%, кверцетина — 92%, гесперидина и карсила — 83%.
Таблица 1 Восстановление характеристик главных патологических синдромов при лечебно-профилактическом внедрении биофлавоноидов, СЭ и карсила в критериях острого СС14-гепатитогепатоза у крыс

скопление; — бег

вещества

Цитолиз

(АлАт,

АсАт,

КФ,

ФЛА2)

Холестаз

(ЩФ,

-ГТП,

ПБ)

Мезенхи-

мальное

воспаление (Воспаление — сложная местная реакция организма на повреждение)

(глобулины,

альбумины

/глобулины,

ТП)

Печеночно-клеточная

дефицитность

синтети-ческая

функция

(общ. белок,

альбуми-

ны, ХЭ)

обезвре-

живающая

функция

(моче-

вина,

НПБ)

метаболическая

функция

(глюкоза сыв.,

гликоген печ.,

ТРГ сыв.,

ТРГ печ., ФЛ печ)

Гесперидин,

100мг/кг

± — ± +

+ — +

± ± —

± ± ±

— +

— ± ± ± +

% восстановления

64,3

65,6

46

61

56,8

71

Диосмин,

100 мг/кг

± — + +

+ + +

+ + ±

+ + ±

+ +

± + ± ±+

% восстановления

82,9

91,2

73,8

78,6

105,3

79

Флавицин, 100 мг/кг

+ + + +

+ + +

+ + ±

+ + +

+ +

+ + ± ±+

% восстановления

89,9

98,5

75,7

83,4

107,5

101,1

Кверцетин, 100 мг/кг

+ + + +

— ± ±

+ + +

+ + ±

+ —

+ + ± ± ±

% восстановления

95,3

45,4

93,1

77,7

67,6

77,2

Сухой

экстракт,

300 мг/кг

+ + + +

+ + +

+ + +

+ + +

+ +

+ + + + +

% восстановления

93,5

99,6

96,7

88,3

104,6

99,2

Карсил,

100 мг/кг

+ + + +

± — ±

+ + +

+ + ±

+ —

— ± ± +

% восстановления

93,6

48,4

96,7

71

65,1

36,3

Примечение

«+» — полная нормализация показателя;

±» — неполная нормализация;

«-» — отсутствие эффекта

Гистоморфологические исследования также свидетельствуют о наиболее высочайшем защитном действии флавицина и СЭ, при применении которых отмечались меньшие патогистологические конфигурации в печени крыс.

В гистологической картине печени крыс, получавших карсил, имелись признаки наиболее выраженного воспаления, нарушения микроциркуляции и жирового перерождения, также отмечалось наличие ступенчатых некрозов и нарушение цитоархитектоники печёночных балок. При анализе воздействия исследуемых веществ, владеющих различной степенью гепатозащитного деяния, на развитие окислительного стресса при остром СС14

характеристики ПОЛ

Характеристики АОС

Примечание: 100% — контроль — CCl4-гепатитогепатоз

— достоверно по отношению к интактным значениям

— достоверно по отношению к патологическому контролю

Набросок 1 — Воздействие биофлавоноидов, СЭ и карсила на систему ПОЛ — АОС при остром СС14-гепатитогепатозе у крысгепатитогепатозе, были установлены разные варианты конфигурации прооксидантной и антиоксидантной составляющей данного процесса (рис.1, таблица 2).

Так, флавицин и СЭ восстановили все изученные характеристики ПОЛ и фактически все характеристики неферментативного и ферментативного звеньев АОС. Кверцетин так же,

как и флавицин и СЭ, вполне сдерживал интенсификацию ПОЛ, но при всем этом не влиял на активность ряда важных антиоксидантных ферментов (СОД, каталаза, Г-S-Т). Напротив, диосмин, существенно наиболее отлично, чем кверцетин, восстановил ферментативное звено АОС (на уровне контроля оставалась лишь активность Г-6-ФДГ), но в наименьшей степени снижал прооксидантный потенциал. Гесперидин и карсил не вполне восстановили как характеристики ПОЛ, так и системы АОЗ, в особенности ее ферментативного звена: у крыс, получавших гесперидин и карсил на уровне контроля находились активности ферментов как 1-ой полосы защиты (Г-S-Т и СОД, ГП, Г-S-Т соответственно), так и ферментов, поставляющих восстановительные эквиваленты для «работы» ГП и Г-S-Т (Г-6-ФДГ, ИЦДГ и МДГ соответственно), так что при всем этом и общая НАДФ+-редуктазная активность вполне не восстанавливалась, в отличие от внедрения других гепатопротекторов (рис.1).

Оценка восстановления про-антиоксидантного равновесия при помощи расчета коэффициента окислительного стресса (таблица 2) показала, что его значения стали практически равными единице в итоге внедрения флавицина и СЭ. Более высочайшие коэффициенты имели звериные, получавшие гесперидин (17,4) и карсил (10,7). При всем этом выявлена тесноватая корреляция меж коэффициентом окислительного стресса и процентом гепатопротекторной активности (r= — 0,850,26, Р0,05). Можно прийти к выводу, что выраженность гепатозащитного деяния значимым образом связана со степенью восстановления про-антиоксидантного равновесия: чем в основном наблюдается восстановление баланса в системе ПОЛ-АОС, тем выше степень защитного деяния. Направляет на себя внимание, что прооксидантную составляющую окислительного стресса кверцетин снижал в основном (до 0,54), чем флавицин (0,92) и СЭ (1,07) но коэффициент окислительного стресса при его внедрении был практически в 2 раза выше (3,4) из-за недостающего восстановления АОС. Это свидетельствуют в пользу того положения, что большее

Таблица 2 — значения коэффициента окислительного стресса и процента гепатопротекции у звериных с CCl4-гепатитогепатозом и при внедрении биофлавоноидов, СЭ из V. truncatula и карсила

Группы звериных

Прооксиданты

(ТБК — акт. продукты печ. x ДК печ),

в отн. ед. к норме

Антиоксиданты

(СОД x каталаза x ГП x Г-S-Т печ),

в отн. ед. к норме

К,

про-/антиоксид.

%

гепато-протекции

Интактные

1

1

1

СС14-гепатитогепатоз

34,8

0,091

382

Введение гесперидина,

100 мг/кг

5,38

0,31

17,4

65

Введение диосмина,

100 мг/кг

2,98

0,48

6,2

84

Введение флавицина,

100 мг/кг

0,92

0,78

1,2

92

Введение кверцетина,

100 мг/кг

0,54

0,16

3,4

77

Введение СЭ,

100 мг/кг

1,07

0,56

1,9

95

Введение карсила,

100 мг/кг

1,75

0,16

10,7

61

Регуляции интенсивности свободнорадикального окисления и поддержание того равновесия в системе ПОЛ/АОС, которое есть в норме. Приобретенные результаты показывают существенную роль не только лишь фактически антиоксидантного деяния флавоноидов, да и усиления эндогенных устройств АОЗ для поддержания и восстановления про-антиоксидантного равновесия в критериях окислительного стресса.

Исследуемые нами флавоноиды и СЭ при их лечебно-профилактическом применении в критериях острого CCl4-гепатитогепатоза, так же, как и карсил, тормозили анаэробные процессы и улучшали аэробный путь производства энергии. При применении гесперидина, диосмина, флавицина, кверцетина и СЭ достоверно уменьшалось соотношение лактат/пируват на 37%, 66%, 87%, 79% и 85% соответственно, повышались активности митохондриальных ферментов: СДГ на 86%, 113%, 239%, 119% и 119%; ЦТО — на 131%, 379%, 402% и 228% соответственно и содержание АТФ в печени на 41%, 63%, 67%, 112% и 64% соответственно. Видно, что в меньшей мере снижал процессы анаэробиоза и увеличивал содержание АТФ в печени гесперидин. Карсил также уступал, по неким показателям, изученным флавоноидам и СЭ: снижал соотношение лактат/пируват на 78%, увеличивал активность ЦТО и содержание АТФ на 191% и 22% соответственно и не влиял на активность СДГ.

Преодолению окислительного стресса содействовало также и то, что исследуемые вещества восстанавливали работу микросомальной монооксигеназной и редуктазной электрон-транспортных цепей, что дозволяет восстановить как продукцию вольных радикалов, так и детоксикационную функцию печени. Наиболее полное восстановление активностей N-деметилазы и n-гидроксилазы при применении флавицина и СЭ, может быть, разъясняется тем, что при всем этом в большей степени обеспечивается защита системы цитохромов Р450 от деградации.

Таковым образом, приобретенные результаты показывают, что выраженность гепатозащитного деяния при остром поражении печени СС14 тесновато связана со способностью восстанавливать про-/антиоксидантное равновесие за счет увеличения эффективности эндогенной системы АОЗ и сопряженных с ней действий энергообеспечения и детоксикации, что является значимым в механизме гепатопротекторной активности флавоноидных соединений и СЭ. Флавицин и СЭ в критериях СС14-гепатитогепатоза нормализуют либо делают лучше фактически одни и те же характеристики, т.е. их действие сходно как в высококачественном, так и количественном отношении. В отношение характеристик белкового обмена и активации мезенхимы СЭ несколько превосходит действие флавицина, что может быть соединено с наличием в его составе доп компонент, к примеру, целого ряда аминокислот, в. т. ч. неподменных.

2. Сравнительное исследование эффективности гепатозащитного деяния флавоноидов, СЭ из V. abbreviate (truncatula) и их воздействия на развитие окислительного стресса при остром спиртном поражении печени

Как понятно, спиртное поражение печени в большенный степени обосновано окислительной деградацией этанола, протекающей в этом органе [Буеверов А.О., 2002, Калинин А.В., 2005, French S. W., 2000, Lieber C. S., 2005] при участии алкогольдегидрогеназы и микросомальной монооксигеназной системы. Лишнее поступление этанола приводит к скоплению ацетальдегида и увеличению образования вольных радикалов в микросомальных е-транспортных цепях, что приводит к усилению ПОЛ, истощению антиоксидантных ресурсов и повреждению биомембран вольными радикалами и продуктами ПОЛ, что и определяется понятием окислительного стресса.

Было установлено, что в итоге 7-дневной алкоголизации наблюдалось увеличение N-деметилазной и НАДФН-НТ-редуктазной активностей на 145% и 57%, возможно, вследствие индукции изоформы цитохрома Р450 2Е I, участвующей в окислении этанола Мальцев А.Н. и др., 2001], что происходит в итоге периодического злоупотребления алкоголем. сразу было выявлено увеличение интенсивности индуцированного ПОЛ ПФП на 128% и содержания ТБК-активных товаров в сыворотке крови (внутренней средой организма человека и животных) на 114%, хотя в печени содержание ТБК-активных товаров и ДК достоверно не поменялось. Это сопровождалось падением эффективности АОЗ на разных уровнях — понижением активности СОД на 41%, каталазы на 50%, общей активности ГП на 51%, Г-S-Т на 38%, содержания GSH на 48%, также вышло понижение активности главных ферментов, поставляющих восстановительные эквиваленты для глутатионредуктазной реакции: МДГ — на 43%, Г-6-ФДГ — на 75% и ИЦДГ — на 57%. При всем этом коэффициент окислительного стресса возрос до 62,5, что указывало на развитие синдрома пероксидации. вместе с сиим, как и при остром CCl4-гепатитогепатозе, происходило формирование тканевой гипоксии, о чём свидетельствовало наиболее чем пятикратное повышение соотношения лактат/пируват, понижение содержания в печени глюкозы и гликогена, являющееся результатом высочайшей интенсивности анаэробного гликолиза и гликогенолиза, также падение активности ферментов митохондрий (СДГ и ЦТО) и интенсивности процесса окислительного фосфорилирования (рост Mg2+-АТФазной активности) и, как следствие, уменьшение содержания АТФ (-59%).

Выявленные конфигурации биохимических характеристик в итоге 7-дневного введения 33% этанола крысам-самкам свидетельствовали о развитии поражения печени с проявлением признаков тех же главных патофизиологических синдромов, что и при СС14-гепатитогепатозе: цитолиза, холестаза, мезенхимального воспаления (с вовлечением иммунного компонента) и печеночной дефицитности. Данные конфигурации были выражены в наименьшей степени, чем при действии СС14, и почти во всем совпадали с теми, которые наблюдаются у нездоровых с различными формами спиртной признаки, соответствующие для спиртного поражения печени: перивенулярное поражение гепатоцитов с баллонной дистрофией и некрозом с превалированием признаков «эозинофильной дегенерации», хотя телец Мэллори, явлений жировой дистрофии, также перицеллюлярного фиброза найдено не было, что свидетельствовало о развитии острого токсического поражения печени умеренной степени тяжести.

Исследуемые флавоноиды и СЭ при спиртном поражении печени также показали гепатозащитные характеристики. Данные таблицы 3 свидетельствуют что, гесперидин уступал всем остальным субстанциям, а флавицин и СЭ, напротив, превосходили их по воздействию на восстановление фактически всех характеристик синдромов цитолиза, холестаза, мезенхимального воспаления, белково-синтетическую и метаболическую функции печени.

Как и при СС14-гепатитогепатозе, кверцетин и карсил превосходили действие диосмина на цитолиз и мезенхимальное воспаление (воспаление — сложная местная реакция организма на повреждение) и добавочно на белково-синтетическую функцию печени, но диосмин был наиболее действенным по действию на холестаз и метаболическую функцию печени (углеводный и липидный обмены), чем кверцетин и карсил, что ясно видно по средним процентам восстановления характеристик соответственных синдромов.

По коэффициенту гепатопротекции с учетом всех биохимических характеристик исследуемые вещества по эффективности гепатопротекторного деяния при остром спиртном поражении печени можно расположить в последующей последовательности: сухой экстракт (97%), флавицин (96%), диосмин (78%), кверцетин (70%), карсил (69%) и гесперидин (38%). Флавицин и СЭ имеют достоверно наиболее высочайшие коэффициенты гепатопротекции, чем кверцетин (70%) и карсил (69%) в 1,4 раза. Процент выживших звериных при применении карсила в процессе 7-дневной алкоголизации был ниже (66,7%), чем при применении диосмина (83,3%), флавицина (100%) сухого экстракта (100%).

Таблица 3 Восстановление характеристик главных патологических синдромов при лечебно-профилактическом внедрении биофлавоноидов, сухого экстракта и карсила в критериях острого спиртного поражения печени у крыс

синдро —

мы

вещества

Цитолиз

(АлАт,

АсАт,

КФ,

ФЛА2)

Холестаз

(ЩФ,

-ГТП,

ПБ)

Мезенхимальное

воспаление (Воспаление — сложная местная реакция организма на повреждение)

(глобулины,

альбумины

/глобулины,

ТП)

Печеночно-клеточная дефицитность

белково-синтетическая

функция

(общ. белок,

альбумины, ХЭ, мочевина)

метаболическая функция

(глюкоза сыв.,

гликоген печ.,

ТРГ сыв.,

ТРГ печ., ФЛ печ)

Гесперидин,

100мг/кг

+ — + +

— ±

± —

± — ± ± —

— + —

% восстановления

63,4

26,1

16,3

26,5

35,7

Диосмин,

100 мг/кг

+ + + +

— + +

+ ± ±

+ ± + ±

++ + + +

% восстановления

93,4

84,4

54,9

54,5

84,3

Флавицин,

100 мг/кг

+ + + +

+ + +

+ ± +

+ + + ±

+ + + + +

% восстановления

115,6

101,9

82,9

65,6

107,6

Кверцетин,

100 мг/кг

+ + + +

— ± +

+ — ±

+ + + ±

+ ± + + —

% восстановления

100,8

55,2

67,2

59

75,3

Сухой

экстракт,

300 мг/кг

+ + + +

+ + +

+ + +

+ + + +

+ + + + +

% восстановления

96,3

94,8

105,1

94,6

95,0

Карсил,

100 мг/кг

+ + + +

+ — +

+ ± ±

+ + ± +

— + + —

% восстановления

108,7

65,3

84,1

56,3

29,0

Примечение «+» — полная нормализация показателя; «±» — неполная нормализация; «-» — отсутствие эффекта

Как и при CCl4-гепатитогепатозе, при спиртном поражении печени, исследуемые флавоноиды, СЭ и карсил содействовали нормализации интенсивности ПОЛ и активности АОС (рис.2). При всем этом во всех вариантах наблюдалась полная нормализация содержания ТБК-активных товаров в сыворотке крови (внутренней средой организма человека и животных) и

характеристики ПОЛ

Характеристики АОС

Примечание: 100% — контроль — спиртное поражение печени

— достоверно по отношению к интактным значениям

— достоверно по отношению к контролю

Обозначения как на рис.1

Набросок 2 — Воздействие биофлавоноидов, СЭ и карсила на систему ПОЛ — АОС при остром спиртном поражении у крыс уменьшение скопления МДА при Fe2+аскорбатиндуцированном ПОЛ ПФП, кроме звериных, получавших гесперидин (скопление оставалось выше нормы на 62%).

В отношении восстановления ферментативной АОЗ можно отметить существенное сходство в действии диосмина, флавицина и СЭ. При применении флавицина и СЭ при спиртной интоксикации на уровне обычных значений находились фактически все характеристики АОС: СОД, каталаза, ГП общ., Г-S-Т, GSH, общая НАДФН+-редуктазная активность (малат+глюкозо-6-фосфат+изоцитрат) с выраженной степенью подъема Г-6-ФДГ. Только активность ИЦДГ при применение СЭ не достигала интактных значений, но при всем этом активность Г-S-Т и ГР были достоверно выше нормы и контроля соответственно. действие диосмина характеризовалось несколько наименьшей эффективностью: из перечисленных характеристик не вполне восстановились общая НАДФ+-редуктазная активность (в главном из-за ИЦДГ) и активность ГП. То же самое можно отметить и в действии кверцетина, но, не считая этого, не вполне восстанавливалась активность каталазы и оставались на низком уровне активности Г-S-Т, ГР и ИЦДГ. Под воздействием гесперидина и карсила наблюдалась полная нормализация СОД и каталазы, фактически в равной мере повышалось содержание GSH. При действии гесперидина отмечалось некое повышение активности ГП, но при внедрении карсила активность данного фермента не поменялась по сопоставлению с звериными, получавшими лишь этанол. В то же время, гесперидин не воздействовал на активность Г-S-Т, а карсил восстановил ее. В отношении НАДФ+-редуктазных активностей при применении гесперидина отмечалось повышение до нормы МДГ при неизмененной активности ИЦДГ. В то же время карсил усиливал активность ИЦДГ, не влияя на МДГ и Г-6ФДГ. В силу этого и общая НАДФ+-редуктазная активность при их внедрении восстанавливалась не полностью.