Загрузка...
Учебная работа. Выделение и идентификация стафилококков из сточных вод животноводческого комплекса "Октябрьский"
УДК 619:579
Выделение и идентификация стафилококков из сточных вод животноводческого комплекса «Октябрьский»
Галкина Е.В., Ефремова Л.Г.
Руководители: Ковалева Е.Н., Золотухин С.Н.
Введение
Стафилококки (Slaphylococcus) — грамположительные сферические клеточки, обычно располагающиеся в виде скоплений, недвижны, не образуют спор, просто окрашиваются всеми анилиновыми красителями. Как патогенные мельчайшие организмы они были идентифицированы одними из первых. В 1881 г. Земмер в первый раз обрисовал стафилококковое часть стафилококков совсем безобидны: из упомянутых 14 видов, лишь 3 способны вызывать работоспособности»> работоспособности»>заболевания (нарушения нормальной жизнедеятельности, работоспособности): золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus), эпидермальный стафилококк (Staphylococcus epidermidis) и сапрофитный стафилококк (Staphylococcus saprophyticus) [3].
Стафилококки — очень всераспространенные представители микрофлоры кожи и слизистых у почти всех видов млекопитающих, в том числе и у человека. Они вызывают огромное количество болезней, в том числе поверхностные и глубочайшие гнойные инфекции (Термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека), интоксикации, инфекции (Термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека) мочевых путей. Посреди возбудителей больничных зараз они занимают 2-ое по частоте пространство [2].
Необходимо отметить, что в появлении стафилококковой инфекции (Термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека) главную роль играет понижение функции иммунной системы. В обычном, здоровом организме иммунитет настроен таковым образом, что проникновение и размножение таковых бактерий как стафилококк фактически исключается либо становится вероятным лишь при нарушении целостности тканевых барьеров.
Для постановки выделенный штамм стафилококка должен владеть коагулазопозитивными качествами (т.е. коагулировать плазму крови (внутренней средой организма человека и животных) при культивировании) либо гемолитическими качествами (т.е. создавать зону гемолиза при культивировании на кровяном агаре). При отсутствии таких параметров у выделенного мельчайшего организма диагноз (медицинское заключение об имеющемся заболевании) на стафилококкоз следует признать непонятным [4].
Материалы и способы
Лабораторные опыты проводились с 2-мя пробами сточных вод, взятых с территориальных участков животноводческого комплекса «Октябрьский», которые в предстоящем по плотности масс обусловили как водянистая и густая пробы.
Для идентификации стафилококков употребляли последующие питательные среды: для выделения стафилококков — мясопептонный бульон (МПБ), кровяной агар; для идентификации кокков — агар с добавлением 6,5% NaCl, агар с добавлением 10% NaCl, агар с добавлением 4% дегидратированной желчи КРС. Все среды готовились в лабораторных критериях и подвергались стерилизации.
Результаты исследовательских работ
Посевы инкубировали при температуре 37°С в течение 24 часов. Выросшие колонии разделяли напополам и из одной половины готовили препараты, окрашивали по Граму и микроскопировали. Микроскопирование колоний на шагах, где колонии прорастали, обосновывало во всех вариантах присутствие стафилококков. Черта роста на разных питательных средах отражена в таблице 1.
Для проведения реакции на фермент каталазу (для дифференциации от стрептококков и энтерококков) брали чашечку Петри с колониями, проросшими на агаре добавлением 6,5% NaCl. На всякую колонию, предположительно стафилококков, наносили каплю 3% перекиси водорода. Доказательством стафилококков являлось вспенивание поверхности колонии.
Таблица 1
Черта роста исследуемых проб на разных питательных средах
№
П/П
Питательная
Среда
рост
Форма колоний
цвет колоний
гемолиз
1 проба
(ЖИДКАЯ)
МПБ
+
диффузное помутнение с следующим выпадением рыхловатого осадка
(нет)
(нет)
агар с добавлением 6,5% NaCl
+
круглые, слегка возвышающиеся над поверхностью агара колонии с ровненькими краями, поперечником
2 — 3 мм
белоснежный
(нет)
агар с добавлением 10% NaCl
+
круглые, слегка возвышающиеся над поверхностью агара колонии, поперечником
3 мм
белоснежный, время от времени кремовый, желтый
(нет)
агар с добавлением 4% дегидратирован-ной желчи КРС
?
(нет)
(нет)
(нет)
кровяной агар
+
круглые колонии с верно выраженными краями, поперечником
0,5-1 мм
желтоватый
значитель-ная зона гемолиза
2 проба
(ГУСТАЯ)
МПБ
+
диффузное помутнение с следующим выпадением рыхловатого осадка
(нет)
(нет)
агар с добавлением 6,5% NaCl
+
круглые, слегка возвышающиеся над поверхностью агара колонии с ровненькими краями поперечником
2-3 мм
белоснежный
(нет)
агар с добавлением 10% NaCl
+
круглые, слегка возвышающиеся над поверхностью агара колонии, поперечником
3 мм
белоснежный, время от времени кремовый, желтый
(нет)
агар с добавлением 4% дегидратирован-ной желчи КРС
?
(нет)
(нет)
(нет)
кровяной агар
+
круглые колонии с верно выраженными краями, поперечником
0,5-1 мм
желтоватый
значитель-ная зона гемолиза
Последующую идентификацию проводили при помощи молока с метиленовой синью, в случае свертывания и пептонизации молока опосля суток с момента посева в него культуры, можно было утверждать о наличии стафилококков.
В итоге опыта обе культуры дали положительную реакцию, как следует, в обоих вариантах в пробах находились стафилококки.
Результаты исследовательских работ биохимических параметров (цветной ряд Гиса на сахара) отражены в таблице 2. наблюдение за цветным рядом велось в течение 14 дней.
Таблица 2
исследование биохимических параметров выделенных стафилококков
Сахара
1 проба
(ЖИДКАЯ)
2 проба
(ГУСТАЯ)
маннит
+/-
+
мальтоза
+
—
глюкоза
+
+
сахароза
—
+
липаза
+
+/-
Опосля этого исследования сделалось вероятным предположение о том, что в пробе №1 находится St.intermedis, а в пробе №2 — St.aureus.
Выводы
В итоге проведенных исследовательских работ, из 2-ух проб было выделено два штамма стафилококков. Доп ферментативные испытания проявили, что выделенные культуры относятся к видам St.intermedis и St.aureus.
Перечень литературы
1. Демина М.Ф. и др. полости рта и ее роль в развитии патологических действий. — М., 1996.
3. другими словами заключения о сути заболевания и состоянии пациента»>диагностика (процесс установления диагноза, то есть заключения о сущности болезни и состоянии пациента) и исцеление главных заразных болезней в современных критериях. — Минск, 1990.
4. Авакян А.А., Кац Л.Н., Павлова И.Б. Атлас анатомии микробов патогенных для человека и звериных. — М., 1972.