Учебная работа. Апирогенность как одно из основных требований к качеству парентеральных лекарственных форм. Пирогенные вещества. Способы депирогенизации

Учебная работа. Апирогенность как одно из основных требований к качеству парентеральных лекарственных форм. Пирогенные вещества. Способы депирогенизации

Министерство здравоохранения и общественного развития РФ

ГОУ ВПО Самарский Муниципальный мед институт

кафедра лекарственной технологии

Курсовая работа на тему:

Апирогенность как одно из главных требований к качеству парентеральных фармацевтических форм. Пирогенные вещества. методы депирогенизации

Выполнил студент:

Манова Мария Александровна

Самара, 2012

Содержание

Введение

Цели и задачки работы

1. Пирогенные вещества

2. Источники и природа пирогенных веществ

2.1 Эндогенные пирогенные вещества

2.2 Экзогенные пирогенные вещества

3. Пирогенал

4. Лихорадка

5. Пирогенная реакция

6. Предотвращение пирогенности фармацевтических препаратов (методы депирогенизации)

7. Получение апирогенной дистиллированной воды для инъекций

8. Хранение воды для инъекций

9. способы определения пирогенных веществ в фармацевтических средствах

9.1 Био способ (испытание на зайчиках)

9.2 Лимулус-тест (LaL-тест)

9.2 Недоступные и малоиспользуемые способы определения пирогенных веществ в фармацевтических средствах

Заключение

Перечень использованной литературы

пирогенный фармацевтический лимулус тест

Введение

В номенклатуре современных фармацевтических препаратов инъекционные фармацевтические формы занимают особенное пространство. В организм их вводят с помощью шприца с нарушением целостности дерматологических покровов либо слизистых оболочек.

Различают две формы введения жидкостей в организм — инъекция (injection — впрыскивание) и инфузия (infusion — вливание). Различие меж ними состоит в том, что 1-ые представляют собой сравнимо маленькие объемы воды, вводимые при помощи шприца, а 2-ые — огромные объемы, вводимые капельно либо струйно. Инфузионные смеси вводятся при разных патологических состояниях, связанных с большенный потерей крови , шоком, нарушением микроциркуляции, интоксикацией. Они способны поддерживать жизнедеятельность клеток не вызывая сдвигов физиологического равновесия. Вводятся в объеме наиболее 100 мл.

Смеси для инъекций — это особенная группа фармацевтических форм, изготовляемых в критериях асептики с следующей стерилизацией.

Асептика — это определенный режим работы, комплекс организационных мероприятий, позволяющий свести к минимуму возможность попадания микробов в фармацевтические препараты на всех шагах технологического процесса. Для обеспечения асептики нужно учесть источники микробной контаминации фармацевтических препаратов. К ним относятся помещения, воздух, вспомогательные и упаковочные материалы, фармацевтические вещества, также работающий персонал. Создание асептических критерий достигается созданием фармацевтических препаратов в специально оборудованном асептическом блоке, комнате, изолированной от остальных помещений аптеки, либо в настольном боксе с внедрением стерильных вспомогательных материалов и посуды.

К инъекционным и инфузионным растворам предъявляется ряд требований: отсутствие механических включений (прозрачность), стабильность, стерильность, апирогенность и особые требования (осмолярность, соответственный ионный состав,

Апирогенность инъекционных смесей обеспечивают четким соблюдением правил получения и хранения апирогенной воды (Aqua pro injectionibus) и критерий производства инъекционных смесей.

Требование апирогенности сначала относится к инфузионным растворам, также к инъекционным при объеме разового введения 10 мл и наиболее.

Свойство смесей для инъекций почти во всем зависит от чистоты воды, применяемой для их изготовления. Количество микробов и сторонних веществ в воде, превосходящие допустимые нормы, установленные Гос фармакопеей IX издания и нормативами, разработанными ЦАНИИ, вызывает возникновение пирогенных параметров у смесей. Пирогенные характеристики обусловливаются пирогенными субстанциями, которые являются продуктами обмена и распада микробов и относятся к соединениям типа всеохватывающих белков, полисахаридов либо липополисахаридов. Смеси для инъекций, владеющие пирогенными качествами, могут вызывать у нездоровых при внедрении увеличение температуры, озноб и остальные болезненные реакции, а при высочайшем содержании пирогенных веществ даже приводить к смертельному финалу.

В связи с сиим Муниципальная фармакопея IX издания просит, чтоб пирогенные вещества отсутствовали в воде для инъекций и смесях фармацевтических веществ для инъекций, а остальные посторонние вещества не превосходили допустимые нормы.

Цели и задачки работы

Цель моей курсовой работы состоит в том, чтоб показать, что одним из главных требований к качеству парентеральных фармацевтических форм является апирогенность. Пирогенные вещества — это продукты жизнедеятельности и распада микробов (основным образом, грамотрицательных), погибшие микробные клеточки. Присутствие этих веществ в инъекционных смесях может вызвать у хворого при внедрении в сосуды, спинномозговой канал пирогенную реакцию — увеличение температуры тела, озноб и остальные болезненные реакции, а высочайшее содержание их может привести к смертельному финалу.

Пирогенные вещества термостабильны и сохраняют пирогенные характеристики опосля стерилизации смесей, проходят через почти все фильтры, и высвободить от их воду, инъекционные смеси методом тепловой стерилизации фактически нереально. Потому весьма принципиальна профилактика образования пирогенных веществ, которая достигается: созданием асептических критерий производства, серьезным соблюдением правил санитарного режима и поведения персонала в асептическом блоке; депирогенизацией трубопроводов, посуды, соединительных трубок. Как следует, весьма принципиально строго соблюдать данные требования на практике при изготовлении парентеральных фармацевтических форм.

1. Пирогенные вещества

Пирогенные вещества (греч. pyr — огнь +gennao — создавать, создавать) — на биологическом уровне активные вещества экзогенного (бактериального и вирусного) и эндогенного (клеточно-тканевого) происхождения, владеющие свойством вызывать перестройку уровня регуляции температурного гомеостаза, приводящую к увеличению температуры тела и развитию лихорадки. Пирогенные вещества относятся к соединениям типа липополисахаридов — веществ с большенный молекулярной массой, достигающей 8 000 000 и размером частиц 0,05- 1 мкм. Активным пирогеном в липополисахаридах является липидная часть, которая действует на терморегуляторные центры и до этого всего всепостоянства внутренней среды»> которому принадлежит ведущая роль в регуляции многих функций организма

и вызывает многофункциональные нарушения в органах и системах организма. Присутствие этих веществ в инъекционных смесях может вызвать у хворого при внедрении в сосуды, спинномозговой канал пирогенную реакцию — увеличение температуры тела, озноб и остальные болезненные реакции, а высочайшее содержание их может привести к смертельному финалу. Более резкие пирогенные реакции наблюдаются при внутрисосудистых, спинномозговых и внутричерепных инъекциях. Сначало это явление было описано в 1865 г. при парентеральном внедрении дистиллированной воды. В 1876 г. в первый раз возник термин «пироген» применительно к субстанциям, выделенным из гниющего мяса. В 1891 г. С. П. Боткин установил, что одной из обстоятельств лихорадочной реакции при брюшном тифе является образование тканевых пирогенов. В период 1892 — 1912 г. г. было установлено, что пирогенная реакция вызывается как {живыми}, так и погибшими микробами. В 1923 г. F. B. Seibert выделил пирогенные вещества из смесей, установил их термостабильность и первым доказал внедрение зайчиков для исследования пирогенной реакции.

2. Источники и природа пирогенных веществ

Различают эндогенные и экзогенные пирогены. 1-ые являются клеточно-тканевыми продуктами, образующимися в определенных критериях. 2-ые — это вещества, находящиеся в бактериях и выделяющиеся в процессе их жизнедеятельности.

2.1 Эндогенные пирогенные вещества

Эндогенные пирогенные вещества образуются в организме при действии бактериальных пирогенных веществ и экзогенных причин, вызывающих воспаление , также при иммунопатологических действиях с ролью лимфокинов. Главным источником эндогенных пирогенных веществ являются моноциты крови , альвеолярные и перитонеальные макрофаги, фиксированные макрофаги селезенки и печени, также нейтрофильные гранулоциты и эозинофилы; они спонтанно синтезируются клеточками неких опухолей. Образование эндогенных пирогенных веществ лейкоцитами осуществляется лишь в критериях патологии при содействии с разными раздражителями и протекает в две фазы: фаза активизации и фаза освобождения пирогенна. Вырабатываемый лейкоцитами пирогенного вещества (лейкоцитарный пироген) термолабильный белок с молекулярной массой 10 000 — 45 000 владеет в очищенном виде высочайшей пирогенной активностью; провоцирует лейкоцитопоэз, синтез иммуноглобулинов и белков (фибриногена, гаптоглобулина, церулоплазмина, C-реактивного белка). В острой фазе воспаления лейкоцитарный пироген не имеет видовой пирогенной специфики. Открытие эндогенных пирогенных веществ позволило доказать современную унитарную теорию лихорадки. Они играют роль белковых медиаторов; их действие на гипоталамические центры теплорегуляции через простагландины и циклические нуклеотиды приводит к смещению уровня регуляции температуры, включению аппарата физической и хим теплорегуляции, к развитию лихорадки.

2.2 Экзогенные пирогенные вещества

Экзогенные пирогенные вещества не действуют конкретно на центры теплорегуляции; их пирогенная активность опосредуется через образование вторичных, эндогенных, пирогенных веществ в организме. Таковой способностью владеют также метаболиты стероидных гормонов, синтетические хемотоксические пептиды и интерфероногенная двуспиральная РНК , которые содержатся в клетках всех живых организмов). Более высочайшей био активностью владеют липополисахариды грамотрицательных микробов, способные увеличивать температуру тела, провоцировать гипофиз-адреналовую систему, лейкоцитопоэз, синтез иммуноглобулинов, образование и выделение лейкоцитами вторичных пирогенных веществ, интерферона, простагландинов, тормозить рубцово-спаечные процессы и др.

Источниками пирогенных веществ в фармацевтических средствах почти всегда являются мельчайшие организмы: основным образов грамотрицательные бактерии, также грибы и даже вирусы. Не считая того, пирогенную реакцию могут вызывать некие хим вещества: продукты термоокислительной деструкции пластмасс (к примеру, фторопластов), суспензия фосфата кальция, нуклеинат натрия и остальные хим вещества.

Носителем пирогенности является эндотоксин (0-антиген), присутствующий в клеточной оболочке микробов и составляющий от 1 до 5 % сухой массы бактериальных клеток. Эндотоксин представляет собой липополисахаридо-протеино-липоидный комплекс.

При его гидролизе образуются не владеющие пирогенностью непростой протеин и липид В, также относительно устойчивый липополисахарид, ответственные за пирогенную реакцию.

Липополисахаридный комплекс является компонентом самой наружной зоны клеточной стены грамотрицательных микробов. При кислотном гидролизе липополисахарид расщепляется на вольный липид А и «деградированный» нетоксичный фосфорилированный полисахарид. Липид А липополисахаридов разных микробов имеет весьма близкое строение, в то время как полисахаридная часть очень различается как собственной молекулярной массой, так и природой моносахаридов. Считают, что пирогенность и токсичность пирогенов определяется конкретно липидом А, полисахарид же на биологическом уровне неактивен и обеспечивает растворимость липополисахаридного комплекса.

Широким варьированием параметров полисахаридов разъясняют значимые колебания у пирогенов, образуемых разными микробами, молекулярной массы (от 10 000 до 8 000 000), размеров частиц (от 50 мкм до 1 мкм) и малой дозы, вызывающей пирогенную реакцию (от 0,001 до 7 мкг/мл).

3. Пирогенал

К экзогенным пирогенным субстанциям относится продукт пирогенал. Пирогенал — биогенный продукт; липополисахаридный комплекс из клеточных оболочек грамотрицательных микробов.

Светло-кремовый бесформенный порошок, просто растворимый в воде. Активность продукта определяют биологическим методом и выражают в малых пирогенных дозах (МПД). За 1 МПД принимают количество продукта, которое при внутривенном внедрении вызывает увеличение температуры тела зайчиков на 0,6 град. МДП обычного пирогенала — 0,01 мкг/кг.

Пирогенал вызывает увеличение температуры тела методом активации ретикулоэндотелиальной и гипоталамо-гипофизарной систем. Провоцирует общую и специфическую резистентность организма, также владеет адъювантными, десенсибилизирующими и антивосполительными качествами. В механизме деяния пирогенала имеет

Лейкоцитарный (эндогенный) пироген, воздействуя на термочувствительные нейроны преоптической области гипоталамуса , содействует увеличению температуры тела. Остальные на биологическом уровне активные вещества, выделяющиеся под воздействием пирогенала, определяют развитие иных эффектов продукта. Так, под воздействием лизосомальных ферментов происходит активация фибринолитической и кининовой систем крови , вследствие что увеличивается проницаемость сосудов, улучшается кровоснабжение и регенерация тканей. Антивосполительное и десенсибилизирущее действие пирогенала обосновано, разумеется, стимуляцией гипофизарно-адреналовой системы. Повышая проницаемость сосудов, пирогенал содействует наилучшему проникновению химиотерапевтических веществ в очаги повреждения.

Пирогенал используют в целях стимуляции репаративных действий опосля травм, ожогов, болезней и поражений нервной системы, для рассасывания патологических рубцов, спаек (к примеру, стриктуры уретры), при неких воспалительных заболеваниях (простатите, уретрите, аднексите и др.), при помутнении роговицы. Пирогенал употребляют также как неспецифическое средство в процесс венерических заболеваний, к примеру сифилиса.

Продукт вводят внутримышечно один раз в денек. Инъекции создают через денек либо пореже (через 2 — 3 денька). Дозы подбираются персонально. Исходные дозы для взрослых обычно составляют 25-50 МПД, для малышей 5-15 МПД. Доза, вызвавшая увеличение температуры до 37,5 — 38,0 град. при следующих инъекциях повторяется до того времени, пока температура закончит повышаться. Опосля этого дозу равномерно наращивают на 25 — 50 МПД. Наибольшая разовая доза для взрослых 1000 МПД, для малышей — 250 — 300 МПД. Зависимо от работоспособности»>заболевания

курс исцеления для взрослых состоит из 10 — 30 инъекций, для малышей — из 10 — 15 инъекций. Интервалы меж курсами не наименее 2 — 3 мес.

При передозировке продукта могут возникать головная , боли в суставах и пояснице, озноб, тошнота , рвота , резкое увеличение температуры тела (время от времени до 39,5 — 40 град.). Эти явления длятся обычно 6 — 8 часов и на сто процентов проходят.

Пирогенал противопоказан при острых лихорадочных заболеваниях и беременности. Лицам страдающим гипертонией и диабетом, пирогенал назначают с осторожностью в уменьшенных дозах.

4. Лихорадка

Лихорадка — типовая терморегуляторная реакция на действие пирогенных раздражителей, выражающаяся перестройкой регулирования температурного гомеостаза организма на поддержание наиболее высочайшего, чем в норме, уровня теплосодержания и температуры тела. Лихорадка является в собственной базе приспособительной реакцией , повышающей естественную резистентность организма при заразных болезнях, хотя при определенных критериях она может приносить вред нездоровому.

К пирогенным агентам, т. е. факторам, вызывающим лихорадочную реакцию, относятся бактерии и вирусы, продукты их распада и вещества, становящиеся в организме объектом фагоцитоза либо пиноцитоза, также любые вещества и действия, повреждающие ткани и вызывающие воспаление . Лихорадочная реакция как особенный терморегуляторный акт развивается при различных болезнях и внедрении в организм разных пирогенных веществ в главном однотипно. Это обосновано тем, что действие экзогенных пирогенных веществ и причин заразной и неинфекционной природы на центральный механизм теплорегуляции непрямое и опосредуется имеющимся в организме физиологическим механизмом пуска и поддержания лихорадки.

Лихорадочная реакция проходит в три стадии: подъем температуры (stadium incrementi), состояние температуры на больших цифрах (stadium fastigii) и спад температуры (stadium decrementi).

5. Пирогенная реакция

При внутрисосудистом внедрении фармацевтических препаратов, содержащих пирогенные вещества, развивается пирогенная реакция. Различают 3 степени пирогенной реакции: легкую, среднюю и томную.

При легкой степени реакции наблюдается незначимые личные расстройства и увеличение температуры до 37 град. Реакция средней тяжести проявляется в ознобе, головной связанное с настоящим либо возможным повреждением ткани «> связанное с истинным или потенциальным повреждением ткани»>боли , повышении температуры до 39 град. и исчезает через несколько часов. При тяжеленной степени пирогенной реакции возникает мощный озноб, боль в пояснице, рвота , одышка, цианоз, увеличение температуры до 40 град. Улучшение наступает только через день. В отдельных вариантах вливания пирогенных препаратов наблюдались смертельные финалы, вызванные обозначенными выше явлениями, также переменами в картине крови , расстройством сердечно-сосудистой деятель, кровоизлияниями в желудочно-кишечном тракте, некрозами в разных органах и др.

В особенности небезопасна пирогенная реакция при внедрении огромных размеров инфузионных смесей в послеоперационном периоде. Малые количества пирогенных веществ приводят к аллергическим явлениям (шприцевая аллергизация).

Большая часть видов микробов вызывают пирогенную реакцию при содержании 104 — 106 микробных клеток в 1 мл раствора. Грамположительные мельчайшие организмы, как правило, не вызывают пирогенную реакцию.

6. Предотвращение пирогенности фармацевтических препаратов (методы депирогенизации)

Пирогенные вещества термостабильны и сохраняют пирогенные характеристики опосля стерилизации смесей, проходят через почти все фильтры, и высвободить от их воду, инъекционные смеси методом тепловой стерилизации фактически нереально. Потому весьма принципиальна профилактика образования пирогенных веществ, которая достигается: созданием асептических критерий производства, серьезным соблюдением правил санитарного режима и поведения персонала в асептическом блоке; депирогенизацией трубопроводов (в вариантах их использования), посуды, соединительных трубок; обработкой их веществом водорода перекиси либо калия перманганата, подкисленного серной кислотой. Также весьма важны: правильное хранение воды для инъекций; депирогенизация натрия хлорида и остальных термостабильных веществ; соблюдение времени от начала производства инъекционных смесей до стерилизации.

Имеющиеся способы депирогенизации подразделяют на хим, физико-химические и энзиматические (крайние не подходящи в лекарственной технологии).

Хим:

· Нагревание в водороде пероксида при 100 0 С в течение 1 часа.

· Выдерживание в подкисленном кислотой серной 0,5 — 1 % растворе калия перманганата в течение 25 — 30 мин.

· Нагревание смесей с добавлением натра едкого.

· Нагревание смесей с добавлением антрахинона.

· Нагревание смесей с добавлением кислоты хлористоводородной.

Но, эти способы не могут отыскать широкого внедрения вследствие одновременного разрушения фармацевтических веществ. Эти способы употребляют для обработки стеклянных соединительных трубок и др.

Физико-химические:

· Адсорбция на активированном угле, коалине, окиси алюминия, асбесте, целлюлозе, крахмале, кизельгуре, также на ионообменных смолах. К недочетам этого способа относится адсорбция фармацевтических веществ, в особенности при использовании угля, также необходимость чистки депирогенизированных смесей от механических включений.

· Ультрафильтрация — процесс разделения и фракционирования смесей, при котором макромолекулы (с М. м. от 1 тыс. до 1 млн.) отделяются от раствора и низкомолекулярных соединений фильтрацией через мембраны. Мембранные фильтры представляют собой тонкие (100 — 150 мкм) пластинки из полимерного материала, характеризующиеся ситовым механизмом задержания микробов и неизменным размером пор. Средний размер пор фильтра, гарантирующего получение стерильного фильтрата, составляет 0,3 мкм. Во избежание резвого засорения фильтра мембраны употребляют в сочетании с предфильтрами, имеющими наиболее большие поры. Мембранные фильтры «Владипор» из ацетата целлюлозы типа МФА могут быть применены для чистки от механических примесей и микробов смесей фармацевтических веществ, имеющих рН в границах от 1,0 до 10,0. Фильтры «Владипор» имеют 10 номеров от 0,05 до 0,95 мкм (для фильтрации воды). Для стерилизации смесей фармацевтических веществ предусмотрены фильтры МФА-3 и МФА-4 со средним размером пор соответственно 0,25 — 0,35 и 0,35 — 0,45 мкм. Выпускаются они в виде пластинок и дисков различного поперечника. Фильтры типа МФА до фильтрования стерилизуют насыщенным водяным паром при лишнем давлении, температура 120+2 0 С либо сухим жарким воздухом при температуре 180 0 С, обработкой формальдегидом, этанолом, водорода пероксидом, окисью этилена, УФ либо радиационным способом. Установлено, что при ультрафильтрации через ацетилцеллюлозный мембранный фильтр «Владипор» УАМ-100 задерживается наиболее 99 % липополисахаридов, обуславливающих пирогенность. С применением ультрафильтрации получены апирогенные смеси глюкозы, аминокислот, апоморфина гидрохлорида, викасола, барбитала натрия и др.

· Удерживание диэлектрическими материалами.

· Стерилизация ионизирующим излучением (радиационный способ).

Данный способ основан на антибактериальном действии -лучей. Стерилизацию проводят в -установках, ускорителях электронов и остальных установках с ионизирующим излучением дозой 25 кГр (2,5 Мрад) в конечной упаковке, имеющих массивные защитные приспособления. Источниками -излучения служат долгоживущие изотопы кобальта-60 и цезия-137. способ рекомендован для изделий из пластмасс, изделий разового внедрения, перевязочных материалов, неких фармацевтических препаратов.

7. Получение апирогенной дистиллированной воды для инъекций

Свойство смесей для инъекций почти во всем зависит от чистоты воды, применяемой для их изготовления. По ГФ ХI вода для инъекций обязана отвечать требованиям, предъявляемым к воде дистиллированной, и быть апирогенной.

Воду для инъекций получают в асептических критериях на основании приказа Минздрава СССР

Получение воды для инъекций делается при помощи аквадистилляторов согласно прилагаемым к ним инструкциям.

Понятно, что пирогенные (высокомолекулярные соединения) вещества нелетучи и не перегоняются с водяным паром. Загрязнение дистиллята пирогенными субстанциями происходит методом перебрасывания мелких капель воды либо уноса их струей пара в конденсатор. Потому главной задачей при получении воды для инъекций является отделение капелек воды от паровой фазы. Для данной нам цели предложены аппараты, в каких в отличие от обыденного дистиллятора водяной пар проходит через особые приспособления различной конструкции — сепараторы. По конструкции они бывают центробежные, пленочные, большие, массообъемные, комбинированные. В центробежных сепараторах создается вращательное движение сепарируемого пара и под действием убыстрений частички воды активно выделяются из потока пара. Пленочные сепараторы состоят из набора пластинок различного профиля, через зазоры которых проходит сепарируемый пар. В больших сепараторах капли воды выпадают из потока пара под действием силы тяжести. В комбинированных употребляется сочетание 2-ух либо нескольких видов сепарации. В неких аппаратах пар проходит длиннющий зигзагообразный путь и на пути в конденсатор равномерно теряет капельно-жидкую фазу.

К числу таковых аппаратов относится аквадистиллятор ДЭ-25 «рис. 1», воду дистиллированную в каком получают методом кропотливой сепарации пара, проходящего через отражательные экраны, расположенные в верхней части камеры испарения. Аппарат обеспечен автоматическим устройством — датчиком уровня, предохраняющим электронагреватели от перегорания в случае снижения уровня воды ниже допустимого. Производительность аппарата 25 л/ч. Невзирая на то что данный аквадистиллятор употребляют в главном для получения воды дистиллированной, он при правильной эксплуатации дает воду апирогенную.

«Рис. 1» Аквадистиллятор ДЭ-25

Для получения воды апирогенной предложен ряд аппаратов различной конструкции, к числу которых относятся аппараты АА-1, А-10 (ДА-10), АЭВС-4, АЭВС-25, АЭВС-60.

Аппарат для получения воды апирогенной АА-1 — аквадистиллятор апирогенный электронный имеет номинальную производительность 1 л/ч. Система и принцип работы аппарата некординально различаются от аквадистиллятора ДЭ-25 «рис. 2».

«Рис. 2» Аппарат для получения воды апирогенной АА-1

Главными частями аппарата являются камера испарения (10) с сепаратором (8), конденсатор (1), сборник-уравнитель (25) и электрощит. Камера испарения (10) снаружи защищена железным кожухом (9), созданным для уменьшения термических утрат и предохранения обслуживающего персонала от ожогов. В дно (12) камеры вмонтированы четыре электронагревателя (11). В камере испарения (10) вода (с добавлением хим реагентов), нагреваемая электронагревателями (11), преобразуется в пар, который через сепараторы (8) и паровую трубку (7) поступает в конденсационную камеру (3), охлаждаемую снаружи прохладной водой, и, конденсируясь, преобразуется в воду апирогенную. Вода апирогенная вытекает через ниппель (5). Для предотвращения увеличения давления в камерах (3) и (10) имеется предохранительная щель (6), через которую может выйти избыток пара.

Охлаждающая вода, безпрерывно поступая через вентиль (4) в водяную камеру (2) конденсатора (1), по сливной трубке (15) соединяется в сборник-уравнитель (25), сообщающийся с камерой испарения (10), созданный для неизменного поддержания уровня воды в ней. Сначала работы аппарата вода заполняет камеру испарения до установленного уровня. В предстоящем, по мере выкипания, вода будет поступать в камеру испарения отчасти, основная же часть через штуцер (26) будет соединяться в сточную канаву. Для зрительного наблюдения за уровнем воды в камере испарения (10) на штуцере сборника-уравнителя (25) имеется водоуказательное стекло (27).

Сборник-уравнитель (25) также предназначен для смешивания воды с хим реагентами, добавляемыми в камеру испарения для получения высококачественной апирогенной воды, отвечающей требованиям фармакопеи. Для данной нам цели в сборнике-уравнителе имеется особая трубка, через которую хим реагенты поступают в камеру испарения (10) вкупе с водой. Строгая доза хим реагентов обеспечивается особым дозирующим устройством, состоящим из 2-ух стеклянных сосудов (22) с капельницами (24), 2-ух фильтров (21) и 2-ух дозаторов (18), соединенных резиновыми трубками.

Дозирующее устройство соединено со сборником-уравнителем (25) через капельницы (24). Крепление дозирующего устройства осуществляется на кронштейне (19), в каком имеются особые отверстия для стеклянных сосудов (22), фиксируемых с помощью резиновых колец (20), и особые пазы, в которые свободно вставлены дозаторы (18). Дозаторы (18) крепятся на кронштейне (19) контргайками (17). Таковым образом, получение воды апирогенной обеспечивается за счет кропотливой сепарации пара, также за счет прибавления в воду по необходимости хим реагентов: калия перманганата, квасцов алюмокалиевых и натрия гидрофосфата, для что имеется особое дозирующее устройство, состоящее из 2-ух стеклянных сосудов с капельницами, фильтрами и дозаторами. В один сосуд помещают раствор натрия гидрофосфата и квасцов алюмокалиевых, в иной — раствор калия перманганата. Дозирующее устройство устанавливают так, чтоб на один литр воды подавалось 0,152 г калия перманганата, 0,228 г квасцов алюмокалиевых и 0,228 г натрия гидрофосфата. Но, вода до дистилляции не освобождается от солей, придающих ей твердость.

Аппарат А-10 работает с производительностью (10 л/ч), но является на техническом уровне наиболее совершенной моделью. Получение воды апирогенной в нем обеспечивается за счет кропотливой сепарации пара, проходящего через отражательные экраны сепаратора, расположенные в верхней части камеры испарения, также за счет прибавления в воду нужных хим реагентов. Аппарат обеспечен датчиком уровня воды, предотвращающим перегорание электронагревателей методом автоматического их отключения от электросети, если уровень воды в камере испарения будет ниже допустимого.

В истинное время выпускают три типа дистилляторов (АЭВС-4, АЭВС-25, АЭВС-60). Они различаются друг от друга производительностью, габаритами и потреблением электроэнергии.

Аппарат АЭВС-4А (дистиллятор электронный с водоподготовкой для получения воды апирогенной) представляет собой стационарную установку, состоящую из последующих составных частей: испарителя, сборника воды для инъекций, трубопроводов, электрошкафа и противонакипного магнитного устройства (ПМУ).

Работа аппарата осуществляется последующим образом: на полосы подачи водопроводной воды находится противонакипное магнитное устройство для освобождения начальной (водопроводной) воды от солей и разных примесей, потом вода попадает в охлажденную рубаху сборника и испаритель. Опосля заслуги данного уровня избытки воды сбрасываются в сточную канаву. Образующийся в камере испарения пар проходит через сепаратор и потом по трубопроводу поступает в сборник, в каком благодаря водяной охлаждающей рубахе пар охлаждается и конденсируется. Опосля наполнения сборника водой электронагреватель в камере испарения отключается. Производительность аппарата — 4 л/ч.

АЭВС-25 (дистиллятор электронный с водоподготовкой для получения апирогенной воды) представляет собой стационарную установку. Аппарат состоит из последующих составных частей: испарителей и 2 ступеней (2), конденсатора (1), сборника воды для инъекций (3) «рис. 3».

На полосы подачи водопроводной воды в испарителе встроено противонакипное магнитное устройство, созданное для подготовительной чистки начальной воды. Сразу с подачей воды в испаритель по специальному трубопроводу водопроводная вода подается в охлаждающую рубаху сборника. Образующийся в испарителе 1 ступени пар проходит через сепаратор и потом по трубопроводу поступает в нагревательную камеру испарителя 2 ступени.

Пароводная смесь из нагревательной камеры и пар, прошедший через сепаратор испарителя 2 ступени, поступают по трубопроводам в сборник. В сборнике благодаря его водяной охлаждающей рубахе проходит конденсация пароводяной консистенции и собирается вода для инъекций.

«Рис. 3» Аппарат для получения воды апирогенной АЭВС-25

Аппарат АЭВС-60 представляет собой аквадистиллятор с водоподготовкой для получения воды апирогенной стационарного типа (производительность 60 л/ч). Принцип работы его этот же, что и у аппарата АЭВС-25.

Вода деминерализованная (Aqua demineralisata) в мед практике применяется вместе с водой для инъекций, для производства инъекционных смесей. Вода деминерализованная для инъекционных смесей выходит методом пропускания начальной воды через стерилизующий фильтр и свежерегенерированные иониты: пористые сильнокислотные катиониты и высокоосновные аниониты в Н- и ОН-формах, потому что они опосля кропотливой отмывки не выделяют в воду никаких примесей. В качестве катионита употребляют КУ-23 либо его аналог КУ-2-8пч, в качестве анионита АВ-171 либо АВ-17-8пс. Ионообменные смолы перед употреблением и временами по мере истощения обменной емкости подвергают регенерации. В качестве стерилизующего фильтра употребляют фильтр Сальникова ( «СФ-5»). Можно применять и остальные, гарантирующие стерильность пропущенной через их воды фильтры: пористые стеклянные, фарфоровые, глиняние, миллипоровые.

В процессе получения воды производят неизменное наблюдение за показаниями кондуктомера для определения электросопротивления воды, т. е. производят контроль за глубиной обессоливания воды.

Воду деминерализованную для инъекционных смесей контролируют в согласовании со статьями ГФ ХI «Вода дистиллированная» и «Вода для инъекций». Срок хранения — не наиболее 24 ч.

8. Хранение воды для инъекций

Огромное значение для свойства воды имеет метод ее сбора и хранение.

Хранить воду для инъекций нужно в закрытых сосудах, защищенных от попадания углерода диоксида и пыли. Сосуды нужно нередко мыть и стерилизовать.

Для данной нам цели рекомендованы сборники воды для инъекций, которые предусмотрены для сбора, хранения и стерилизации воды в аптеках и стационарных целительных учреждениях. Вместимость сборников 40 л (СИ-40) и 100 л (СИ-100). Сборники воды для инъекций «рис. 4» изготовлены из нержавеющей стали, снабжены трубчатыми электорнагревателями, фильтром воздуха, устройством для наблюдения за уровнем воды, питающим патрубком, сливным краном и температурным датчиком, отключающим электронагреватели при повышении температуры стен сборника выше 1000 С. Сборники могут присоединяться к одному либо нескольким аппаратам для получения воды для инъекций, работающим сразу.

Для сохранения стерильности воды апирогенной в ряде аптек производят подачу ее от аквадистиллятора к рабочему месту помощника по стерильному стеклянному трубопроводу. На пути следования по трубопроводу вода стерилизуется ультрафиолетовой радиацией. Хранение в сборниках воды для инъекций и подача ее на рабочее пространство помощника осуществляется в согласовании с приказом Минздрава СССР

Контроль свойства воды для инъекций. На основании приказа Минздрава СССР

9. Способы определения пирогенных веществ в фармацевтических средствах

В связи значимой трудности предохранения фармацевтических средств от микробной контаминации и большенный угрозы пирогенной реакции фармакопеями почти всех государств мира, в том числе СССР

Проверке на пирогенность подвергают смеси, вводимые внутривенно в размерах 10 мл и наиболее (ГФ XI). Непременно должны проверяться 5% раствор глюкозы, изотонический натрия хлорид, 10% раствор желатина. один раз в квартал (приказ Минздрава № 573 от 30. 11. 62 г.) проводят испытание на пирогенность воды для инъекций. Принципиально инспектировать также препараты, получаемые из природного сырья (лекарства, ферменты, экстракты из печени, препараты крови , лизаты белков и т. п.). Требуют также проверки пирогенности вода и остальные воды, применяемые для промывания флаконов, ампул, устройств для инфузий, изделий из стекла, пластмассы и резины, в каких содержатся либо с которыми соприкасаются препараты для вливания; шприцы разового использования; пластмассы и резины, используемые при изготовлении смесей для инъекций.

9.1 Био способ (испытание на зайчиках)

Согласно ГФ XI испытание пирогенности проводят на зайчиках (био способ). Берут зайчиков обоего пола массой от 1,5 до 2,5 кг, содержащихся в строго регламентированных критериях и имеющих начальную ректальную температуру от 38,50 С до 39,50 С. Смеси испытуемых фармацевтических веществ либо препаратов и водянистые фармацевтические препараты вводят в количествах и растворителях, обозначенных в соответственных фармакопейных статьях либо особых инструкциях. Применяемая для разведения вода для инъекций обязана быть стерильной и апирогенной. Для тесты воды для инъекций из нее за ранее готовят 0,9%-ный раствор натрия хлорида, используя депирогенизированный и простерилизованный (нагреванием при 2500 С в течение 30 мин либо при 1800 С в течение 2 ч) натрия хлорид. количество вводимого раствора натрия хлорида составляет 10 мл на 1 кг массы.

Стерильные испытуемые смеси, нагретые до 370 С, вводят зайчикам в ушную вену.

Испытание всякого раствора проводят на 3 зайчиках, измеряя ректальную температуру 3 раза с промежутками 1 ч.

Вода либо раствор фармацевтического вещества числятся непирогенными, если опосля введения ни у 1-го из 3-х подопытных зайчиков ни при одном из 3-х измерений не наблюдалось увеличение температуры наиболее, чем на 0,60 С по сопоставлению с начальной температурой, и в сумме увеличение температуры у 3 зайчиков не превышало 1,40 С.Если эта сумма превосходит 2,20 С, воду для инъекций либо исследуемый раствор фармацевтического средства считают пирогенным. Когда сумма повышений температуры тела у 3-х зайчиков находится в границах от 1,5 до 2,20 С, испытание повторяют добавочно на 5 зайчиках. Нормативными документами установлены тест-дозы на апирогенность смесей: для смесей натрия гидрокарбоната 1 мл/кг массы тела звериного; глюкозы 5 и 10 % концентрации — 10 мл/кг (в виде 5 % раствора), 20 и 40 % концентрации — 10 мл/кг (в виде 10 % раствора); для солевых смесей: «Хлосоль», «Трисоль», «Квартасоль», «Квинтасоль», Рингера — Локка и остальных — 10 мл/кг массы тела звериного.

Рассмотренный способ имеет ряд существенных недочетов: необходимость содержать огромное количество подопытных звериных, значимые колебания чувствительности зайчиков к пирогенам, высочайшая стоимость анализа.

9.2 Лимулус-тест (LaL-тест)

В истинное время более многообещающим способом тесты на пирогенность можно считать лимулус-тест (LaL-тест). Способ основан на возможности лизированных клеток (амебоцитов) крови крабов Limulus poliphemus реагировать с бактериальными пирогенными эндотоксинами, образуя гель.

Лизат амебоцитов Limulus (LaL) получают последующим образом. Отбирают иглой образованная водянистой соединительной тканью . Состоит из плазмы и форменных частей: клеток лейкоцитов и постклеточных структур: эритроцитов и тромбоцитов»> образованная жидкой соединительной тканью. Состоит из плазмы и форменных элементов: клеток лейкоцитов и постклеточных структур: эритроцитов и тромбоцитов»>кровь краба, помещают ее в буферный раствор. Отделяют центрифугированием амебоциты, являющиеся единственными клеточками крови краба, отмывают их гипертоническим веществом натрия хлорида, а потом лизируют, добавляя дистиллированную апирогенную воду. Приобретенный LaL, лежащий при +40 С, устойчив в течение 9 месяцев.

Лимулус-тест проводят, соединяя в асептических критериях в пробирке 0,1 мл испытуемого раствора с 0,1 мл LaL. Смесь инкубируют при 370 С в течение от 15 до 90 мин при рН от 6,0 до 8,0, не подвергая ее встряхиванию. При наличии пирогенных эндотоксинов грамотрицательных микробов появляется гель, который находится по повышению вязкости консистенции, потере ею текучести. При повороте пробирки на 1800 гель не должен разрушаться.

Лимулус-тест уже в 1980 г. включен в ХХ фармакопею США

Предложена также новенькая модификация лимулус-теста, проводимого в капилляре с применением всего 1 мкл реагента заместо 0,1 мл при минзурочном способе. Для чтения результата капилляр с обскурантистской консистенцией погружается вертикально в окрашенный раствор. Если гель образовался, то раствор не поступает в капилляр, и, напротив, при отсутствии пирогенов окрашенный раствор заполняет капилляр.

Капиллярный вариант лимулус-теста дозволяет найти весьма малые количества эндотоксина, к примеру в случае E. Coli — до 0,02 нг/мл.

Необыкновенную Ценность лимулус-теста представляет для определения пирогенов в продуктах, которые не могут быть испытаны официальным тестом вследствие того, что они увеличивают температуру у зайчиков (метиленовый голубий, соединения, содержащие ион фосфата и др.) либо, напротив, понижают ее (анестетики, кортикостероиды, антипирин, фенотиазины и др.), также в случае короткоживущих радиофармацевтических препаратов.

К недочетам лимулус-теста относится воздействие на него неких фармацевтических веществ, замедляющих либо ускоряющих образование геля. Так, новокаин, гексаметилентетрамин ингибируют эту реакцию, а смеси калия хлорида, натрия лактата ускоряют ее, что ведет к получению неверных результатов. В связи с сиим в схожих вариантах испытуемые смеси за ранее освобождаются от мешающих определению фармацевтических веществ методом ультрафильтрации, позволяющей отделить низкомолекулярные вещества от высокомолекулярных пирогенов.

9.3 Недоступные и малоиспользуемые способы определения пирогенных веществ в фармацевтических средствах

К физическим способам относится полярография. С. Ш. Чаусовским разработана методика определения пирогенности воды и ряда фармацевтических препаратов, основанная на возможности пирогенных веществ подавлять полярографический максимум кислорода. Но полярографический способ по чувствительности обнаружения пирогенных веществ на 2 порядка уступает био испытанию на зайчиках.

Л. Е. Щедриной и Л. И. Брутко разработана методика люминесцентного анализа определения бактериальных пирогенов в дистиллированной воде, основанная на изменении спектральных параметров 2-ух красителей (родамина 6Ж и 1-анилино-нафталин-8-сульфоната) в присутствии пирогенов. Но обозначенная методика не может обширно употребляться, потому что она осуществляется с применением малодоступного и драгоценного флуориметра марки СДЛ-1.

Пирогенообразующие мельчайшие организмы, также бактериальные липополисахариды владеют поглощением в УФ —области при 259 — 260 нм. В связи с сиим разработана методика обнаружения пирогенов в дистиллированной воде и 0,9%-ном растворе натрия хлорида, включающая предварительное концентрирование пирогенов с следующим определением оптической плотности. Но и эта методика не отыскала внедрения в практике, потому что просит использования малодоступных кварцевых кювет с шириной слоя 10 см либо же недоступной аппаратуры для концентрирования пирогенов способом ультрафильтрации с применением особых мембранных фильтров.

За рубежом на ряде лекарственных компаний в истинное время для определения пирогенности применяется микробиологический способ, основанный на подсчете общего числа микробов в анализируемом образчике до его стерилизации. Так, вода для инъекций считается пирогенной, если в ней содержится наиболее 10 микробов в 1 мл.

Недочетом этого способа является отсутствие дифференциации грамположительных и грамотрицательных микробов, потому что конкретно крайние обуславливают пирогенность смесей. В связи с сиим бесспорный практический Энтузиазм представляет улучшенный способ обнаружения пирогенов, основанный на избирательной идентификации грамотрицательных микробов в присутствии 3%-ного раствора гидроксида калия.

По методике Л. Е. Щедриной и Л. И. Брутко на предметное стекло наносят 1 каплю 3%-ного раствора гидроксида калия и заносят в нее одну либо несколько (до 10) колоний микробов, выращенных на мясопептонном агаре. Если в течение 1 мин взвесь микробов становится вязкой, желеобразной, тянется за петлей, то анализируемая воды (Aqua pro injectionibus) и критерий производства инъекционных смесей.

В связи с сиим в курсовой работе были тщательно рассмотрены методы депирогенизации (хим и физико-химические); способы и аппараты для получения апирогенной воды для инъекций; способы определения пирогенных веществ в фармацевтических средствах (био способ, лимулус-тест и др.).

Требования к получению воды апирогенной регламентированы в приказе Минздрава СССР

Свойство сделанных фармацевтических форм для инъекций впрямую зависит от критерий производства. Как следует, ясна значимость строжайшего соблюдения асептических критерий производства инъекционных фармацевтических препаратов на всех шагах, независимо от следующей стерилизации.

Перечень использованной литературы

1. Бакулев А. Н. Большая мед энциклопедия. Том 24. Издание 2-ое. — М.: Государственное научное издательство «Русская энциклопедия», 1962.

2. Валевко С. А. Вода для лекарственных целей. Незапятнанные помещения. — М.: ЯСИНКОМ, 1998.

3. Валевко С. А., Соколова Л. Ф., Карчевская В. В. Современные требования к воде, применяемой для изготовления фармацевтических средств. Животрепещущие препядствия лекарственной технологии. — М.: НИИФ, 1994.

4. Кондратьева Т. С. Разработка фармацевтических форм: Учебник в 2 томах. Том 1. — М.: медицина, 1991.

5. Краснюк И. И., Михайлова Г. В. Лекарственная разработка. Разработка фармацевтических форм. — М.: Издательский центр «Академия», 2006.

6. Методические указания по изготовлению стерильных смесей в аптеках (утв. Минздравом Рф 24 августа 1994).

7. Молдавер Б. Л. Асептически приготовляемые фармацевтические формы.: текст лекций. — Л.: 1990.

8. Петровский Б. В. Большая мед энциклопедия. Том 19. — М.: Издательство «Русская энциклопедия»,1982.

9. Приказ Минздрава Рф от 21 октября 1997 г. № 308 «О утверждении аннотации по изготовлению в аптеках водянистых фармацевтических форм».

10. Изготовление, хранение и распределение воды чистой и воды для инъекций: МУ-78-113. — М., 1998.

11. Применение мембранной технологии и остальных средств фильтрования при изготовлении стерильных смесей: методические советы. — М., 1995.

12. Синев Д. Н., Марченко Л. Г., Синева Т. Д. Справочное пособие по аптечной технологии фармацевтических средств. Издание 2-е. — С-Пб.: Невский диалект, 2001.

13. Тенцова А. И. Справочник фармацевта. — 2-е издание, перераб. и дополн. — М.: медицина, 1981.

14. Фармакопея СССР

]]>