(5 оценок, среднее: 4,80 из 5)
Загрузка...
Учебная работа. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на нейтрофилы и факторы мукозального иммунитета
14.03.09 — клиническая аллергология, иммунология
На правах рукописи
Автореферат
диссертации на соискание учёной степени доктора
био наук
Воздействие низкоинтенсивного лазерного излучения на нейтрофилы и причины мукозального иммунитета
Гизингер Оксана Анатольевна
Челябинск, 2010
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА работы
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ
Одним из ведущих направлений современной иммунологии является поиск средств и методов избирательного действия на отдельные этапы развития иммунного ответа (Покровский В.И., 1994; Долгушин И.И., Бухарин О.В., 2001; Ильина Н.И., 2005; Тотолян А.А., 2007). Многообещающим подходом к решению данной трудности может являться применение физических действий в качестве немедикаментозных стимуляторов клеточного и гуморального звеньев иммунитета (Купин В.И.,1995; Баранов В.Н., 1998; Клебанов Г.К., 2000).
Клинические и экспериментальные исследования, проведённые в крайнее десятилетие, свидетельствуют о способности модуляции иммунных реакций организма при действии на него таковых физических причин, как лазерное излучение. В стратегическом плане заслуживает внимание исследование потенциала физиотерапевтических целительных действий и оценка их воздействия на причины врождённого иммунитета с учётом выбора оптимальных характеристик действий (Гладких С.П., 1996; Конопля А.И.,1998; Буйлин В.А., 2001; Москвин С.В., 2005; Неймак Б.А, 2005; Ефремов А.В., 2005). Внедрение низкоинтенсивного лазерного излучения сделалось в крайние годы одним из распространённых компонент всеохватывающей процесс воспалительных болезней (Ляшенко В.А., 1998; Калинина С.Н., 2004; Лукьянов Н.В., 2004; Павлов В.Н., 2004; Jansen E.D.,1997; Selman S. N., 1998). В истинное время принято считать, что низкоинтенсивное лазерное излучение (НИЛИ) очень отлично при разных патологических действиях, в том числе для корректировки локальной и системной иммунной дефицитности (Васильев А.П., 1999; Сафаров Р.М., 2000).
В успешном решении вопросцев, связанных с эффективностью лазеротерапии, большая роль отводится правильно подобранным характеристикам излучения. Но, используемые в опыте и медицинской практике физиотерапевтические подходы могут оказывать на иммунную систему нездоровых разные по силе и по направленности эффекты, что, соответственно вызывает значимые трудности в вопросцах их внедрения. Фактически отсутствует адекватное экспериментальное обоснование используемых доз действия (Соловьёва В.И., 2001; Полунина Т.Е., 2002; Москвин С.В., 2005). Остаются неясными вопросцы воздействия лазера на нейтрофилы и причины мукозального иммунитета при воспалительном процессе. Такое положение затрудняет развитие обозначенного направления иммунокоррекции и делает его довольно животрепещущим для предстоящего исследования. Моделирование иммунного ответа на действие лазерного излучения в опыте дозволит установить пороговые значения, более действенные для их локального и системного действия (Ларюшин А.И.,1997; Горяйнов И.И.,1998; Каплан М.А., 1998; Золотарёва Т.А., 2000; Козель А.И., 2000). Обозначенные происшествия обусловили цель и направления реального исследования.
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ
На основании морфофункциональных, цитохимических, биохимических черт нейтрофильных гранулоцитов изучить дозозависимые эффекты лазеров низкой интенсивности с неизменной и переменной генерацией импульса и оценить способности лазеротерапии для корректировки причин врождённого иммунитета.
задачки ИССЛЕДОВАНИЯ
1. Проанализировать действие разных частот, доз излучения, времени экспозиции низкоэнергетического лазерного излучения с переменной генерацией импульса на реактивность нейтрофилов донорской крови (внутренней средой организма человека и животных) in vitro
2. В экспериментальных исследовательских работах изучить воздействие дозы излучения, времени экспозиции низкоэнергетического лазерного излучения с неизменной генерацией импульса на многофункциональную активность нейтрофилов донорской крови (внутренней средой организма человека и животных).
3. Провести сравнительный анализ деяния разных характеристик низкоэнергетического лазерного излучения с неизменной и переменной генерацией импульса на функции нейтрофилов, выделенных их донорской крови (внутренней средой организма человека и животных).
4. Изучить биохимический, цитокиновый состав и выявить индивидуальности состояния нитроксидергической системы, уровень дефенсинов супернатантов нейтрофилов периферической крови (внутренней средой организма человека и животных), облучённых лазером низкой интенсивности с переменной и неизменной генерацией импульса.
5. Найти нрав нарушений клеточного, гуморального звеньев иммунной системы, нитроксидергических особенностей периферической крови (внутренней средой организма человека и животных) дам при воспалительных заболеваниях нижнего отдела урогенитального тракта, вызванных хламидиями, и проанализировать динамику конфигураций исследуемых характеристик при внутрисосудистом лазерном облучении крови (внутренней средой организма человека и животных).
6. Изучить воздействие лазера низкой интенсивности на морфологический состав и многофункциональную активность нейтрофильных гранулоцитов в очаге воспалительной реакции при заболеваниях нижнего отдела репродуктивного тракта, вызванных хламидиями.
7. Провести сравнительный анализ воздействия локальных лазерных действий при неизменной и переменной генерации импульса на динамику клеточных и гуморальных причин местной противоинфекционной защиты репродуктивного тракта.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА
В экспериментальных исследовательских работах установлены закономерности деяния разных характеристик низкоинтенсивного лазерного излучения с неизменной и переменной генерацией импульса на морфофункциональные, цитохимические, биохимические свойства нейтрофильных гранулоцитов, выделенных из периферической крови (внутренней средой организма человека и животных) доноров. Экспериментально обусловлена возможность оптимизации внедрения лазерных действий за счёт конфигурации характеристик излучения.
Показано, что действие лазером низкой интенсивности с неизменной и переменной генерацией импульса влияет на секреторный, антибактериальный и фагоцитарный потенциал нейтрофильных гранулоцитов. Выявлен однонаправленный нрав их конфигураций, которые зависели от дозы излучения и времени экспозиции.
В работе дана сравнительная оценка биохимического и цитокинового состава супернатантов нейтрофилов, выделенных из периферической крови (внутренней средой организма человека и животных) доноров, облучённых лазером низкой интенсивности с переменной и непрерывной генерацией импульса. Прослежены конфигурации в уровне секреции неактивированными и активированными лазерным излучением нейтрофилами крови (внутренней средой организма человека и животных) доноров уровня дефенсинов, провоспалительных цитокинов (ИЛ-1б, ИЛ-1в, ИЛ-8, ФНО-б), глюкозы, макроэлементов (Са2+, Мg2+). Выявлены индивидуальности состояния нитроксидергической системы супернатантов нейтрофилов, интактных и активированных лазером низкой интенсивности. Показано, что эти конфигурации имеют однонаправленный нрав, степень выраженности которых различна.
Проанализировано воздействие внутривенного лазерного излучения на иммунореактивность организма и определено положительное воздействие данного вида излучений на динамику иммунологических, биохимических характеристик, состояния нитроксидергической систем периферической крови (внутренней средой организма человека и животных) дам.
Проведен сравнительный анализ воздействия лазерного излучения на функции нейтрофилов и причины мукозального иммунитета в всеохватывающей для снятия либо устранения симптомов и проявлений работоспособности»>заболевания (нарушения нормальной жизнедеятельности, работоспособности)«>терапии ( оздоровление»>терапия — процесс, для снятия или устранения симптомов и проявлений работоспособности»>заболевания) урогенитального хламидиоза. Выявлен однонаправленный нрав конфигураций причин местной противоинфекционной защиты при локальном применении лазерного излучения с неизменной и переменной генерацией импульса, сопровождающийся нормализацией количества нейтрофилов в очаге воспаления и восстановлением их многофункциональной активности.
В первый раз установлена высочайшая эффективность локального и системного лазерного действия при неизменной и переменной генерации импульса в всеохватывающем года. Заявка на изобретение № 2009117799.
ТЕРЕТИЧЕСКАЯ И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ работы
Приобретенные данные о воздействии разных режимов лазерного излучения низкой интенсивности на морфофункциональные, цитохимические, биохимические свойства нейтрофильных гранулоцитов, биохимическом составе особенностях состояния нитроксидергической системы супернатантов нейтрофилов периферической крови (внутренней средой организма человека и животных), облучённых лазером низкой интенсивности с переменной и неизменной генерацией импульса, имеют существенное
Практическое действия лазера низкой интенсивности. Приобретенные результаты открывают перспективу для проведения последующих испытаний использования лазеров низкой интенсивности с целью иммунокоррекции при воспалительных заболеваниях репродуктивного тракта.
ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА защиту
1. В экспериментальных критериях действие лазером низкой интенсивности приводит к усилению многофункциональных способностей нейтрофильных гранулоцитов, которые появляются в усилении их микробоцидного потенциала, выраженность данных конфигураций имеет дозозависимый эффект, зависящий от режима генерации импульса.
2. При исследовании in vitro деяния низкоинтенсивного лазерного излучения с неизменной и переменной генерацией импульса на многофункциональную активность нейтрофилов периферической крови (внутренней средой организма человека и животных) доноров выявлено стимулирующее воздействие лазеров низкой интенсивности генерирующих излучение с длиной волны 0,63 мкм, частотой 100Гц (единица частоты периодических процессов в Международной системе единиц СИ) дозой излучения 0,56 Дж/см2, времени экспозиции 12,5 мин
3. Супернатанты нейтрофилов периферической крови (внутренней средой организма человека и животных) доноров содержат провоспалительные цитокины (ИЛ-1б, ИЛ-1в, РАИЛ, ИЛ-8, ФНО-б), растворимые антимикробные причины (оксид азота, дефенсины, антибактериальный/индуцирующий протеин), глюкозу, ионы кальция, магния. индукция нейтрофилов крови (внутренней средой организма человека и животных) лазерным излучением с неизменной и переменной генерацией импульса приводит к усилению их секреции, степень выраженности которой зависит от режима генерации импульса и биоэффективных доз действия.
4. У пациенток с воспалительными болезнями урогенитального тракта выявлено подавление иммунореактивности организма, что проявляется переменами клеточных и гуморальных факторах иммунитета, состояния нитроксидергической системы, нормализация которых наступала при всеохватывающей для снятия либо устранения симптомов и проявлений работоспособности»>заболевания
(нарушения нормальной жизнедеятельности, работоспособности)«>терапии ( оздоровление»>терапия — процесс, для снятия или устранения симптомов и проявлений работоспособности»>заболевания) с применением внутрисосудистого лазерного облучения крови (внутренней средой организма человека и животных).
5. Сравнительный анализ локальной иммунокоррекции с применением лазерного излучения с переменной и неизменной генерацией импульса при воспалительных заболеваниях нижнего отдела репродуктивного тракта, вызванных хламидиями обусловил однонаправленный, положительный нрав воздействий данных физических действий на причины местной противоинфекционной защиты репродуктивного тракта. Более выраженные конфигурации иммунологической активности происходили при использовании лазерного излучения с переменной генерацией импульса.
ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ
способы системного и локального действия лазерным излучением нездоровых с воспалительными болезнями урогенитального тракта внедрены в практику работы Муниципального лечебно-профилактического учреждения здравоохранения «Челябинский областной кожно-венерологический диспансер», консультационно-диагностического центра ГОУ ВПО «Челябинская муниципальная мед академия»; Результаты исследования внедрены в учебный процесс на кафедрах: дерматовенерологии, аллергологии и иммунологии, микробиологии, вирусологии иммунологии ГОУ ВПО «Челябинская муниципальная мед академия Федерального агентства по здравоохранению и соц развитию».
АПРОБАЦИЯ работы
Главные положения диссертации доложены: на научной конференции «Животрепещущие трудности практической медицины» (г. Челябинск 2004, 2005, 2006, 2007), Международном конгрессе по иммунореабилитации (г. Москва, 2005), IV конференции иммунологов Урала (г.Уфа, 2005), «Международном конгрессе по иммунореабилитации» (г.Москва, 2005), конференции, посвященной 25-летию ЦНИЛ ЧелГМА «Новейшие лабораторные технологии в диагностике и лечении (процесс для облегчение, снятие или устранение симптомов и работоспособности»>заболевания) болезней человека» (Челябинск, 2006), V конференции иммунологов Урала (Оренбург, 2006), Всероссийском форуме с интернациональным ролью им. академика В.И.Иоффе «Деньки иммунологии в Санкт-Петербурге» (г. Санкт-Петербург, 2006), научно -практической конференции «Животрепещущие вопросцы дерматовенерологии» (г. Челябинск, 2006), юбилейной научно-практической конференции, посвящённой 60-летию дерматологической службы области «Заслуги и перспективы развития дерматовенерологии» (г. Челябинск, 2007), конференции, посвящённой 60-летию поликлиники ЧелГМА «Животрепещущие вопросцы теоретической и практической медицины» (Челябинск, 2007), научно-практических конференциях Челябинской областной публичной организации докторов — лаборантов (г. Челябинск, 2005, 2006, 2007, 2008), 2-м Русско-чешском мед форуме с интернациональным ролью (г. Челябинск, 2006), Научно-практической конференции «Магнитные поля и здоровье человека» (Курск, 2007), VII конференции иммунологов Урала (г. Ижевск, 2007), материалах VI итоговой научно-практической конференции юных учёных (г. Челябинск, 2008), VI конференции иммунологов Урала (г. Оренбург, 2008), ХIII объединённом всероссийском иммунологическом форуме с интернациональным ролью имени академика В.И. Иоффе «Деньки иммунологии в Санкт-Петербурге» (г.Санкт-Петербург, 2009), VII конференции иммунологов Урала «Животрепещущие вопросцы базовой и медицинской аллергологии и иммунологии» (г. Архангельск, 2009) Всероссийском съезде дерматовенерологов (г. Казань, 2009), Научно-практической конференции Центрального федерального окрестность Русской Федерации с интернациональным ролью (г.Тверь, 2009)
ПУБЛИКАЦИИ
По теме диссертации размещено 44 печатных работы.
ОБЪЁМ И СТРУКТУРА ДИСЕРТАЦИИ.
Диссертация изложена на 354 страничках машинописного текста, содержит 71 таблицу и 12 рисунков. Состоит из введения, обзора литературы, главы «Материалы и способы исследования», 5 глав собственных исследовательских работ, обсуждения приобретенных результатов и выводов. Библиография содержит в себе 395 литературных источников, в том числе 270 российских и 125 забугорных
СОДЕРЖАНИЕ работы
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Экспериментальный шаг исследования
В согласовании с задачками были изучены многофункциональная активность нейтрофильных гранулоцитов (НГ) донорской крови (внутренней средой организма человека и животных) при действии на их, в критериях in vitro, лазерного излучения с разными дозами. Для получения нейтрофилов употребляли 15,0 мл гепаринизированной (10-15 ЕД/мл гепарина компании «Гедеон- Рихтер», Hungery) периферической крови (внутренней средой организма человека и животных), которую с целью осаждения эритроцитов отстаивали в стерильной пробирке с добавлением 10% раствора желатина в соотношении 10:1 при температуре + 37 єС в течение минут. Нейтрофилы выделяли из лейкоцитарной взвеси в двойном градиенте плотности стерильных смесей фиколла-верографина (Parmacia, Sweden, Spofa, CSSR). Плотность верхнего слоя градиента составляла 1.075-1.077, а нижнего 1.093-1.095 (Wong L., 1975). Объём всякого градиента приравнивался 1,5 мл. количество нейтрофилов доводили до концентрации 5 х10 6 клетокмл.
Было исследовано два вида низкоинтенсивного лазерного излучения (неизменная и переменная генерацию импульса). При облучении нейтрофилов употребляли лазерный излучатель «Мустанг-2000». действие на нейтрофилы проводили в кювете со светопоглощающими стенами таковым образом, чтоб мощность лазерного излучения, на уровне дна кюветы, измеренная при помощи дозиметра («Анод», Наша родина), соответствовала избранным дозам. Доза облучения, рассчитанная с учётом частоты следования импульса от 20 до 2500Гц (единица частоты периодических процессов в Международной системе единиц СИ), мощности излучения, поперечника светового пятна лежала в интервале значений 0,0018-1,1 Джсм2. Применяемые режимы почаще всего используются в экспериментальной и медицинской практике (Александрова О.Ю., 2003). Для проведения опыта нейтрофилы облучали при неизменной длине волны 0,63 мкм. Световое поле для облучения взвеси НГ изменяли таковым образом, чтоб в хоть какой точке зоны облучения (единица частоты периодических процессов в Международной системе единиц СИ), 100 Гц (единица частоты периодических процессов в Международной системе единиц СИ), 500 Гц (единица частоты периодических процессов в Международной системе единиц СИ), 2500 Гц (единица частоты периодических процессов в Международной системе единиц СИ), которые подбирали таковым образом, чтоб обеспечить равные дозовые перегрузки при всех режимах действия при проведении опыта.
Многофункциональную активность интактных и облучённых лазером низкой интенсивности нейтрофилов определяли по возможности клеток к поглощению частиц латекса, лизосомальной активности (Фрейдлин И.С., 1984), показателям НСТ-теста (Маянский А.Н., Виксман М.Е., 1979).
Выделение секреторных товаров полиморфноядерных лейкоцитов, выделенных из крови (внутренней средой организма человека и животных) здоровых доноров и стимулированных лазерным излучением низкой интенсивности, проводили при помощи способа, разработанного И.И. Долгушиным и А.В. Зурочкой (Долгушин И.И., Зурочка А.В., 1992).
С целью подробного исследования товаров секреции интактных и облучённых нейтрофилов мы определяли их биохимический и цитокиновый состав. При исследовании биохимического состава товаров секреции полиморфноядерных лейкоцитов мы изучили содержание глюкозы, макроэлементов (Са2+, Мg2+), товаров метаболизма оксида азота, содержания НАДФ-оксидазы в нейтрофилах. Количественное определение глюкозы производили при помощи набора «Глюкоза-ФКД» на биохимическом анализаторе Roki (Ольвекс диагностикум, Санкт-Петербург). Содержание кальция и магния в супернатантах нейтрофилов проводили унифицированным калориметрическим способом на биохимическом анализаторе Roki (Ольвекс диагностикум, Санкт-Петербург). Определение оксида азота, нитратов, нитритов в супернатантах нейтрофилов, проводилось фотометрическим методом (Емченко Н.Л. с соавт., 1994 г.), в модификации Э.Н. Коробейниковой (2002 г). Определение активности фермента НАДФН-оксидазы в нейтрофилах было изучено спектрофотометрическим методом на спектрофотометре Shimadzu (Япония).
При оценке цитокинового состава супернатантов нейтрофилов определяли наличие в их последующих провоспалительных цитокинов: ИЛ-1б, ИЛ-1в, РАИЛ 1, ИЛ-8, ФНО-б. С данной для нас целью употребляли надлежащие тест-системы ООО «Цитокин»(г. Санкт-Петербург), основанные на «сендвич-методе» твёрдофазного ИФА с применением пероксидазы хрена в качестве индикаторного фермента (Кетлинский С.А., Калинина К.М., 1998). Определение дефенсинов, антибактериального белка BPI в сыворотке супернатантах интактных и активированных НИЛИ нейтрофилов определяли при помощи набора реактивов «HNP1-3» (HyCult biotechnology», Нидерланды) с внедрением способа основанного на двухсайтовом твёрдофазном ИФА.
исследование воздействия лазерного излучения на функции нейтрофилов и причины мукозального иммунитета репродуктивного тракта in vivo
За период с 2005 по 2008 год нами проведено открытое, короткосрочное, обычное, «слепое» рандомизированное исследование воздействия лазеротерапии на состояние клеточных и гуморальных причин местной и системной противоинфекционной защиты у 80 здоровых и 386 дам с болезнями нижнего отдела репродуктивного тракта, находившимся на обследовании и возраст 80 здоровых дам составил 26,5±0,95, средний возраст инфицированных дам -27,2 ±2,08 лет. 386 дам с монохламидийной и хламидийно-микоплазменной заразой нижнего отдела репродуктивного тракта сопоставимые по возрасту, гинекологическому анамнезу, отсутствию соматической патологии, однонаправленным изменениям системного и локального иммунного статуса были разбиты согласно принципу адаптивной рандомизации последующим образом: Первую группу нездоровых составили 100 дам с хламидийной заразой нижнего отдела репродуктивного тракта. Обнаружение ДНК (Дезоксирибонуклеиновая кислота — макромолекула, обеспечивающая хранение, передачу из поколения в поколение и реализацию генетической программы развития и функционирования живых организмов) возбудителей производилась с внедрением способа полимеразной цепной реакции (ПЦР) с внедрением исследовательских тест-систем ООО «Литех», г. Москва. Диагноз (медицинское заключение об имеющемся заболевании) ставился врачом-дерматовенерологом в согласовании с интернациональной статистической систематизацией заболеваний МКБ-10 (2000). Всем дамам с хламидийной заразой нижнего отдела репродуктивного тракта поводилась базовая бактерицидную, десенсебилизирующую вместе с базовой была местно использована лазеротерапия с внедрением аппарата «МУСТАНГ-2000» (режим неизменной генерации импульса). Длина волны излучения 0,632 мкм, неизменный режим генерации импульса, время облучения 10 минут. Курс исцеления составил 10 каждодневных процедур
В третью группу вошли 106 дам, которым в комплексе с базовой оздоровление»>ноги согнуты в тазобедренных суставах и разведены (Александрова О.Ю., 2003). Процедура локальной лазеротерапии проводилась с помощью специальной разовой насадки, которая рассеивала исходящее из терминала аппарата лазерное излучение во все стороны. Длина волны излучения 0,632 мкм, переменный режим генерации импульса время облучения 10 минут.
Курс исцеления составил 10 процедур и занимал один межменструальный просвет. Исцеление с применением низкоинтенсивного лазерного излучения производилось согласно методическим советам УГМАДО г. Челябинска (2000г.), внедрение лазеротерапии при снятие или устранение симптомов и заболевания»>лечении (процесс для облегчение, снятие или устранение симптомов и вместе с базовым крови (внутренней средой организма человека и животных) (ВЛОК) аппаратом «МУЛАТ». Положение нездоровой при проведении лазеротерапии — лёжа на кушетке, на спине. Процедура лазеротерапии проводилась с помощью разовых стерильных световодов с иглой (КИВЛ-01(ОС-2), методом венопункции в локтевую либо подключичную вену вводят иглу узким стерильным световодом ОС-2 (НПЛЦ «Техника», г. Москва), через который происходит облучение протекающей крови (внутренней средой организма человека и животных). Длина волны излучения 0,632 мкм, мощность излучения 1мВт, неизменный режим генерации импульса время облучения 40 минут. Курс исцеления составил 7 каждодневных процедур (Управление по использованию аппарата «МУЛАТ», 2008).
Все исследования проводились на основании информированного добровольческого письменного согласия обследуемых. Аспекты включения: наличие хламидийной инфекции (Термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека) нижнего отдела репродуктивного тракта дам. Аспекты исключения: наличие тяжёлой соматической патологии (ИБС, стенокардии, гипертонической работоспособности»>заболевания, острых и обострение приобретенных болезней, онкозаболеваний, аутоиммунной патологии), производящиеся в специализированных клеточках желёз внутренней секреции»>вирус иммунодефицита человека, вызывающий ВИЧ-инфекцию — работоспособности, последняя стадия которой известна как синдром приобретённого иммунодефицита СПИД) инфекции (Термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека), остальных зараз, передающихся половым путём, включая папилломавирусную, герпетическую, цитомегаловирусную инфекции (Термин означает различные виды взаимодействия чужеродных микроорганизмов с организмом человека), несогласие пациенток на роль в исследовании.
Всеохватывающее обследование нездоровых с хламидийной заразой нижнего отдела репродуктивного тракта включало сбор анамнеза, осмотр, комплекс инструментальных способов исследования, включающих ультразвуковое исследование половых органов производилось на ультразвуковом сканере Aloka SSD-680, цитологическое исследование мазков с экзо- и эндоцервикса; биопсию шеи матки с следующим гистологическим исследованием приобретенного материала (Прилепская В.Н., Кондриков Н.И. и соавт., 2000), кольпоскопию с оценкой состояния слизистой оболочки нижней трети цервикального канала,
Бактериологическое исследование на наличие гонококков и трихомонад, проводилось согласно методическим советам МЗ РФ (Российская Федерация — исследование материала из заднего свода влагалища и цервикального канала. Микроскопии подвергались окрашенные по Граму и метиленовым голубым мазки. Определение грибов рода Candida проходило с внедрением среды Сабуро и 5 % кровяного агара. Диагностическим завышенным титром грибов рода Candida была концентрация 103 КОЕ / мл и выше.
Оценка локального и системного иммунного статуса, была проведена до начала исцеления и на его заключительном шаге. Материалом для исследования служили периферическая крови (внутренней средой организма человека и животных) определяли полное количество лейкоцитов, лейкоцитарную формулу, содержание лимфоцитов, несущих нервные (относящиеся к пучкам нервов) импульсы По месту расположения и по выполняемым функциям выделяют экстерорецепторы интерорецепторы и пропри CD3, CD4, CD8, CD16, CD25, CD34, CD95, CD HLA-DR у здоровых и дам с хламидийной заразой нижнего отдела репродуктивного тракта по методике имунофенотипирования в модификации С.В. Сибиряка и соавт.(1997) с внедрением моноклональных крови (внутренней средой организма человека и животных) изучали по возможности клеток к поглощению частиц латекса, лизосомальной активности (Фрейдлин И.С., 1984), показателям НСТ-теста (Маянский А.Н., Виксман М.Е., 1979).
Определение содержания цитокинов (ИЛ-1б, ИЛ-1в, РАИЛ1, ИЛ-8, ФНО-б, ИФН-г), концентрацию IgА, IgМ, IgG, дефенсинов, белка ВРI сыворотки крови (внутренней средой организма человека и животных) и в цервикальном секрете проводилось с внедрением соответственных тест-систем для иммуноферментного анализа (ООО «Цитокин» г. Санкт-Петербург; ООО «Стибиум», г. Санкт-Петербург; ООО «Вектор-Бест», г. Новосибирск; «Hycult biotechnology», Нидерланды). Концентрацию циркулирующих иммунных комплексов в периферической крови (внутренней средой организма человека и животных) и цервикальном секрете устанавливали при помощи способа, предложенного В. Гашковой с соавт. (1978).Уровень общей гемолилитической активности комплемента (СН50) определяли способом титрования по 50% гемолизу. Содержание компонент комплемента в сыворотке крови (внутренней средой организма человека и животных) определяли способом молекулярного титрования (Красильников А.П.,1984). Содержание оксида азота и его метаболитов в сыворотке крови (внутренней средой организма человека и животных) и цервикальном секрете определяли фотометрическим методом (Емченко Н.Л. с соавт., 1994 г.), в модификации Э.Н. Коробейниковой (2002 г). исследование липидного диапазона крови (внутренней средой организма человека и животных): общий холестерин (органическое соединение, природный жирный, липофильный спирт, содержащийся в клеточных мембранах всех живых организмов за исключением безъядерных) (ОХС), природный жирный липопротеинов низкой плотности (ХС ЛПНП), находящийся в клеточных мембранах всех {живых} организмов кроме безъядерных»> липофильный спирт (органическое соединение, природный жирный, липофильный спирт, содержащийся в клеточных мембранах всех живых организмов за исключением безъядерных) липопротеинов высочайшей плотности (ХС ЛПВП), триглицериды (ТГ) проводилось ферментным методом на автоматическом биохимическом анализаторе «Cobas intesra 400 plus» (Швецария). Вычисление уровня ХС ЛПНП проводилось по формуле W. Freidwald (1972): ХС ЛПНП=ОХС-ТГ/2,2- ХС ЛПВП
Данные, обработанные способами вариационной статистики, выражали в виде средней арифметической и ее обычной ошибки. О достоверности различий средних величин судили при помощи непараметрических критериев: Манна-Уитни (U), Колмогорова-Смирнова (КS). Статистические процедуры, применяемые для анализа высококачественных признаков, включали построение таблиц сопряженности и вычисление четкого аспекта Фишера (однобокий вариант) При проведении множественных сравнений употребляли поправку Бонферрони (Гланц С., 2004; Сергиенко В.И., 2000). Результаты исследования обрабатывались на ПЭВМ с внедрением пакета прикладных программ «Statistica for Windows», приобретенные данные выражали в Интернациональной системе единиц (Липперт Г., 2002).
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Шаг исследования in vitro
Для решения поставленной цели, в экспериментальной модели было исследовано воздействие низкоинтенсивного лазерного излучения (НИЛИ) на нейтрофилы, выделенные из периферической крови (внутренней средой организма человека и животных) доноров, и их секреторные продукты. Выбор донорских нейтрофилов в качестве клеток мишеней ЛО (лазерного облучения) был обоснован с одной стороны, их полифункциональной ролью в поддержании защитной реакции организма, а с иной, доступностью, и, в определённом смысле простотой исследования отдельных характеристик их многофункциональной активности (Прозорова С.Г., 1998; Чичук Т.В.,1999; Юдина О.М., 2007). В согласовании с поставленной задачей, была изучена многофункциональная активность нейтрофилов донорской крови (внутренней средой организма человека и животных) при действии на их, в критериях in vitro, разных доз лазерного излучения (ЛО), биохимический состав супернатантов интактных и облучённых лазером нейтрофилов.
Было исследовано два режима низкоинтенсивного лазерного излучения (неизменная и переменная генерацию импульса). Для проведения экспериментальных исследовательских работ был применен лазерный излучатель «МУСТАНГ-2000» (НПЛЦ «Техника», г. Москва). В серии опытов, в подобных критериях выделенные из крови (внутренней средой организма человека и животных) доноров нейтрофилы подвергали лазерному облучению суспензию, температура взвеси нейтрофилов составила 370C. Для проведения ЛО нейтрофилов в силиконизированную кювету со светоизолированными стенами вносился 1 мл раствора Хенкса, содержащего 105 нейтрофилов. Клеточки облучали сверху при неизменной длине волны 0,63 мкм, так как по данным С.В Москвина (2004) длина волны 0,63 мкм соответствует на ионном уровне зоне адсорбции главных метаболитов НГ в световом диапазоне излучения лазера (Ben-Her E., 1993). Доза облучения взвеси нейтрофилов, рассчитанная с учётом частоты следования импульса от 20 до 2500Гц (единица частоты периодических процессов в Международной системе единиц СИ) лежала в интервале значений 0,0018-1,1Джсм2. время экспозиции 5-ти кратно увеличивалось-30 сек, 2,5 мин, 12,5 мин. Интактные нейтрофилы подвергали темновой инкубации при подобных критериях, но без ЛО.
Для исследования многофункциональной активности НГ интактных и облучённых лазером с неизменной и переменной генерацией импульса, биохимических особенностей супернатантов нейтрофилов были применены иммунологические способы: определение лизосомальной фагоцитарной, активности нейтрофилов по НСТ-тесту, и биохимические способы — исследование активности НАДФ-оксидазы нейтрофилов, цитокинового профиля, содержания макроэлементов и глюкозы в супернатантах нейтрофилов.
анализ дозозависимых эффектов деяния ЛО с переменной генерацией импульса показал стимулирующее воздействие излучений при длине волны 0,63 мкм, частоте 100 Гц (единица частоты периодических процессов в Международной системе единиц СИ), и дозой действия 0,56Джсм2. При данных параметрах нами отмечено наибольшее усиление причин кислородзависимой микробоцидной системы и фагоцитарной активности НГ. Лизосомальная активность нейтрофилов в ответ на стимуляцию лазером при повышении дозы излучения с от 0,0018 Джсм2 до 0,56Джсм2 понижалась; наблюдаемый процесс связан с тем, что активированные лазером нейтрофилы отчасти либо на сто процентов утрачивают свои гранулки, подвергаются дегрануляции либо экзоцитозу, что не противоречит данным А.И. Козеля и Г.К. Попова по данной дилемме (Козель А.И., Попов Г.К., 2000) (таблица 1).
Так как вместе с ЛО при переменных действиях также употребляются излучения с неизменной генерацией импульса, последующей задачей исследования было исследование воздействия дозы, времени экспозиции лазерного излучения с неизменной генерацией импульса на многофункциональную активность нейтрофилов донорской крови (внутренней средой организма человека и животных).
По воззрению С.В.Москвина данный вид излучения владеет не наименее высочайшей селективностью деяния на био объекты, чем НИЛИ с переменной генерацией импульса (Москвин С.В., 2000). Условия выделения и проведения опыта были подобны модели, использованной нами при исследовании воздействия излучения с переменной генерацией импульса.
Таблица 1.
Сравнительный анализ дозозависимого воздействия НИЛИ с переменной генерацией импульса с частотой 100Гц (единица частоты периодических процессов в Международной системе единиц СИ), при длине волны 0,63 мкм, экспозиции 12,5 мин. на многофункциональную активность нейтрофилов периферической крови (внутренней средой организма человека и животных) доноров (М±m)
характеристики
Дозы облучения в Дж/см2
0,018
0,036
0,072
0,14
0,28
0,56
1,1
Показатель люминесценции лизосом,
у.е
451.3±14.57*
294.3±12.51*,**
224.3±11.54*,**
224.6±11.59*,**
195.6±11.51*,**
156.6±11.52*,**
206.6±11.50*,**
Активность лизосом, %
95.21±1.25*
68.21±1.25*,**
44.21±1.12*,**
60.2±1.16*,**
49.2±1.12*,**
38.2±1.13*,**
78.2±1.12*,**
НСТ- спонтанная, %
43.88±1.59*
53.55±1.44*,**
61.1±1.41*,**
67.1±1.24*,**
72.1±1.34*,**
96.1±1.42*,**
30.1±1.41*,**
НСТ- спонтанная, у.е
0.48±0.05*
0.65±0.05*,**
0.78±0.02*,**
0.82±0.01*,**
0.88±0.01*,**
0.98±0.01*,**
0.50±0.01*,**
НСТ-индуцированная,
%
67.86±1.45*
73.86±1.42*,**
74.86±1.32*,**
83.86±1.34*,**
93.86±1.31*,**
99.86±1.22*,**
43.86±1.23*,**
НСТ-индуцированная, у.е
0.79±0.03*
0.82±0.03*,**
0.75±0.02*,**
0.81±0.01*,**
0.88±0.01*,**
0.96±0.01*,**
0.52±0.01*,**
Многофункциональный резерв нейтрофилов
2.49±0.13*
1.30±0.13*,**
1.18±0.11*,**
1.15±0.11*,**
1.25±0.11*,**
1.1±0.12*,**
1.43±0.12*,**
Активность фагоцитоза,%
64.19±1.54*
75.19±1.53*,**
85.19±1.32*,**
89.19±1.21*,**
94.19±1.30*,**
98.19±1.31*,**
44.19±1.31*,**
Интенсивность фагоцитоза
2.16±0.11*
3.13±0.12*,**
3.62±0.11*,**
3.66±0.15*,**
3.81±0.10*,**
4.01±0.13*,**
1.62±0.14*,**
Примечание: *-достоверность различий характеристик по отношению к неактивированным нейтрофилам, **-достоверность различий характеристик различных групп, применен аспект Мана-Уитни
Таблица 2
Сравнительный анализ дозозависимого воздействия НИЛИ с неизменной генерацией импульса при длине волны 0,63 мкм, экспозиции 12,5 мин. на многофункциональную активность нейтрофилов периферической крови (внутренней средой организма человека и животных) доноров(М±m)
характеристики
Дозы облучения в Дж/см2
0,018
0,036
0,072
0,14
0,28
0,56
1,1
Показатель люминесценции лизосом,у.е
300.19±12.12*
259.19±10.14*,**
249.19±12.22*,**
230.19±10.21*,**
229.19±11.16*,**
201.19±11.04*,**
181.19±13.02
*,**
Активность лизосом, %
90.08±1.02*
79.08±1.03*,**
72.08±1.01*,**
69.08±1.03*,**
63.05±1.03*,**
56.08±1.04*,**
48.05±1.03
*,**
НСТ- спонтанная, %
35.59±1.25*
42.59±1.22*,**
44.59±1.20*,**
54.59±1.22*,**
64.59±1.23*,**
88.59±1.19*,**
98.59±1.20
*,**
НСТ- спонтанная, у.е
0.39±0.01*
0.47±0.03*,**
0.58±0.03*,**
0.62±0.04*,**
0.69±0.03*,**
0.76±0.04*,**
0.89±0.01
*,**
НСТ-индуцированная,
%
58.13±1.41*
69.13±1.44*,**
79.13±1.41*,**
82.13±1.42*,**
89.13±1.43*,**
95.13±1.44*,**
99.13±1.41
*,**
НСТ-индуцированная, у.е
0.67±0.03*
0.79±0.01*,**
0.88±0.02*,**
0.91±0.02*,**
0.94±0.03*,**
0.96±0.01*,**
0.98±0.03
*,**
Многофункциональный резерв нейтрофилов
2.27±0.11*
1.65±0.10*,**
1.79±0.11*,**
1.79±0.13*,**
1.41±0.12*,**
1.10±0.14*,**
1.02±0.11
*,**
Активность фагоцитоза,%
54.85±1.21*
66.85±1.20*,**
72.85±1.21*,**
80.85±1.23*,**
86.85±1.20*,**
95.85±1.24*,**
98.85±1.22
*,**
Интенсивность фагоцитоза
1.78±0.09*
2.1±0.09*,**
2.31±0.09*,**
2.51±0.09*,**
2.55±0.09*,**
2.65±0.09*,**
2.75±0.09
*,**
Примечание: *-достоверность различий характеристик по отношению к неактивированным нейтрофилам, **-достоверность различий характеристик различных групп, применен аспект Мана-Уитни
исследование in vitro разных характеристик ЛО с неизменной генерацией импульса дозволил выявить лучшую дозу, при которой записанно наибольшее усиление многофункциональной активность НГ. Таковыми параметрами являются доза излучения 1,1 Дж/см2, время экспозиции 12,5мин (20-кратное повышение времени экспозиции от начального) (таблица2).
Анализ приобретенных результатов показал, что при импульсном режиме излучения доза, нужная для наибольшей активации клеточки (0,056Джсм2) ниже значений, позволяющей достигнуть аналогичного эффекта при ЛО с неизменной генерацией импульса (1,1Джсм2). Тем не наименее, конфигурации многофункциональной активности клеток имели схожую динамику, направленную в сторону усиления активности нейтрофила, независимо от режима следования импульса. Результаты наших исследовательских работ коррелируют с воззрением И.И. Горяйнова (Горяйнов И.И.,1998), о том, что действие кванта света на различных режимах излучения имеет схожее биостимулирующее действие на клеточку, т. е настоящая природа фотоакцепторов квантов света оказывается не имеющей решающего значения, ибо их количество и обилие полностью может уравнивать (усреднять) вторичные эффекты лазерных действий.
Более значимые конфигурации зарегистрированы нами при анализе воздействия НИЛИ с переменной и неизменной генерацией импульса на процессы внутриклеточной бактерицидности НГ. Можно представить, что это данный процесс связан со стимуляцией лазерным излучением активности, локализованных в гранулках цитоплазмы НГ ферментов гексозомонофосфатного шунта, а именно НАДФ*H-оксидазы, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, отвечающей за редукцию НСТ (Маянский А.Н., 2006).
Для исследования корректности нашего догадки проведено измерение активности фермента НАДФ*Н-оксидазы, которой принадлежит главная роль в развитии респираторного взрыва, так как данный фермент производит транспорт электронов от НАДФ цитозоля к молекулярному кислороду, а НИЛИ может являться физическим катализатором выработки данного фермента (таблица 3).
Результаты исследовательских работ подтверждают наше предположение о том, что НИЛИ провоцирует выработку локализованных в гранулках цитоплазмы нейтрофилов фермента — НАДФ*Н оксидазы, так как нами записанно достоверное усиление выработки данного фермента наиболее выраженное при облучении взвеси НГ с лазером с переменной генерацией импульса при дозе излучения 0,56 Дж/см2
Таблица 3
Воздействие лазерного излучения с неизменной и переменной генерацией импульса на выработку НАДФН-оксидазы нейтрофилами, выделенными из крови (внутренней средой организма человека и животных) доноров (М±m)
Доза лазерного
излучения
Джсм2
Скорость НАДФН-оксидазной реакции пмоль/мин х106клеток
Неактивированные
нейтрофилы
Нейтрофилы, активированные ЛО с неизменной
генерацией
импульса
Нейтрофилы, активированные ЛО с переменной генерацией
импульса
0,018
1.03±0.16
1.93±0.18
*,***
2.13±0.12
*,**
0,036
1.80±0.11
2.81±0.11
*,***
3.08±0.21
*,**
0,072
2.72±0.25
3.75±0.25
*,***
4.07±0.15
*,**
0,14
3.01±0.31
3.79±0.31
*,***
4.17±0.30
*,**
0,28
4.11±0.15
5.31±0.15
*,***
5.99±0.10
*,**
0,56
4.51±0.13
5.29±0.23
*,***
6.21±0.19
*,**
1,1
4.61±0.33
5.91±0.13
*,***
6.95±0.10
*,**
Примечание: *-достоверность различий характеристик по отношению к неактивированным нейтрофилам, **-достоверность различий характеристик по отношению к НГ, облучёнными с неизменной генерацией импульса, ***- достоверность различий характеристик по отношению к НГ, облучёнными с переменной генерацией импульса С учетом поправки Бонферрони критичный уровень р составил 0,003. U-критерий Мана- Уитни.
Для исследования секреторной функции нейтрофилов был проанализирован цитокиновый состав (таблица 4), содержание высокомолекулярных пептидов-дефенсинов и антибактериального протеина BPI (таблица 5), биохимический состав супернатантов нейтрофилов (таблица 6). В итоге проведённых исследовательских работ нами было выявлено, что нейтрофилы, приобретенные из периферической крови (внутренней средой организма человека и животных) доноров и инкубированные в термостате в течение 30 мин. при температуре 37єС в растворе Хенкса выделяют глюкозу, метаболиты азота, ионы кальция, магния, ИЛ-1б, ИЛ-1в, РАИЛ1, ИЛ-8, ФНО-б. Возникновение этих товаров в супернатантах неактивированных нейтрофилов обосновано, может быть, секреторной дегрануляцией клеток, происходящей при инкубации нейтрофилов не в физиологических критериях in vitro. Потому термин «неактивированные нейтрофилы» мы можем принимать только условно, как выделенные без индуктора секреции клеток, т.е. без лазерного излучения. Уровни изучаемых цитокинов в супернатантах неактивированных нейтрофилов доноров достоверно отличались от содержания в секреторных продуктах, выделенных опосля активации нейтрофилов лазерным излучением с неизменной и переменной генерацией импульса. Эти конфигурации имели однонаправленный нрав, степень выраженности которых была различной.
Таблица 4
Содержание цитокинов в супернатантах нейтрофилов неактивированных и активированных лазерным излучением с неизменной и переменной генерацией импульса (М±m)
Цитокины
Супернатанты
неактивированных
нейтрофилов
характеристики излучения
Супернатанты
нейтрофилов
активированные
ЛО с неизменной
генерацией
импульса
Супернатанты
нейтрофилов
активированных
ЛО с переменной
генерацией
импульса
ИЛ-1б, пг/мл
51.42±0.29
59.83±0.54
*, ***
62.43±4.41
*,**
ИЛ-1в, пг/мл
14.28±0.12
20.36±0.87
* ,***
24.47±12.21
*, **
РАИЛ-1,пг/мл
99.36±2.42
99.67±1.92
100.98±2.10
*
ИЛ-8, пг/мл
44.48±1.39
69.8±1.88
*, ***
136.8±21.71
*, **
ФНО -б, пг/мл
2.21±0.45
4.24±0.75
*, ***
6.31±0.33
*, **
Примечание: *-достоверность различий характеристик по отношению к неактивированным нейтрофилам, **-достоверность различий характеристик по отношению к НГ, облучённых лазером с неизменной генерацией импульса, ***- достоверность различий характеристик по отношению к НГ, облучённых лазером с переменной генерацией импульса С учетом поправки Бонферрони критичный уровень р составил 0,003. U-критерий Мана- Уитни.
анализ цитокинового состава показал достоверно наиболее высочайшее содержание провоспалительных цитокинов ИЛ-1б, ИЛ-1в, РАИЛ1, ИЛ-8, ФНО-б в супернатантах нейтрофилов крови (внутренней средой организма человека и животных) доноров, облучённых лазером с переменной генерацией импульса (таблица 4). Может быть, данный вид излучений является стимулирующим фактором, приводящим к достоверно, по сопоставлению с неактивированными и активированными НИЛИ с неизменной генерацией импульса НГ доноров наиболее выраженной секреции преформированных цитокинов. Кроме этого, в секреторных продуктах нейтрофилов были обнаружены высокомолекулярные пептиды, владеющие иммунотропной активностью-дефенсины и антибактериальный/индуцированный протеин BPI (таблица 5).
Таблица 5
Содержание дефенсинов и белка BPI в супернатантах нейтрофилов неактивированных и активированных лазерным излучением с неизменной и переменной генерацией импульса (М±m)
Пептидные продукты нейтрофилов
Супернатанты
неактивированных
нейтрофилов
характеристики излучения
Супернатанты
нейтрофилов
активированные
ЛО с неизменной
генерацией
импульса
Супернатанты
нейтрофилов
активированных
ЛО с переменной
генерацией
импульса
Дефенсины, пг/мл
4.47±0.95
4.78±0.59
*, ***
6.47±0.45
*,**
BPI, пг/мл
0.67±0.20
0.75±0.22
*, ***
0.99±0.33
*,**
Примечание: *-достоверность различий характеристик по отношению к неактивированным нейтрофилам, **-достоверность различий характеристик по отношению к НГ, облучённых лазером с неизменной генерацией импульса, ***- достоверность различий характеристик по отношению к НГ, облучённых лазером с переменной генерацией импульса С учетом поправки Бонферрони критичный уровень р составил 0,003. U-критерий Мана- Уитни.
Результаты исследования биохимического состава секреторных товаров неактивированных и стимулированных лазерным излучением нейтрофилов проявили последующее (таблица 6). Продукты метаболизма оксида азота (NO) присутствовали как в супернатантах нейтрофилов интактных, так активированных ЛО НГ. Содержание метаболитов азота в супернатантах облучённых лазером нейтрофилов возросло в 3,7 раза по сопоставлению с содержанием товаров метаболизма оксида азота с супернатантах интактных НГ. Наиболее чем на 50% возросло содержание нитратов и нитритов в секреторных продуктах нейтрофилов, облучённых лазером низкой интенсивности.
Таблица 6
Биохимический состав в супернатантах нейтрофилов неактивированных и активированных лазерным излучением с неизменной и переменной генерацией импульса
Составляющие
Супернатанты
неактивированных
нейтрофилов
характеристики излучения
Супернатанты
нейтрофилов
активированные
ЛО с неизменной
генерацией импульса
Супернатанты
нейтрофилов
активированных
ЛО с переменной
генерацией импульса
Нитраты, мкмоль/л
15.21±3.43
31.11±7,23
*, ***
39.19±7,26
*,**
Нитриты, мкмоль/л
43.1±5.17
82.38±22,83
*, ***
99.38±22.11
*,**
Общее содержание метаболитов оксида азота, мкмоль/л
28.31±8.35
137.91±35,24
*, ***
166.9±34.29
*,**
Са2+ моль/л
0.22±0.01
0.52±0.02
*, ***
0.70±0.04
*,**
Мg, 2+ моль/л
0.98±0.02
0.58±0,04
*, ***
0.48±0.03
*,**
Общее содержание глюкозы мкмоль/л
4.95±0,05
3.25±0.05
*, ***
2.01±0.02
*,**
Примечание: *-достоверность различий характеристик по отношению к неактивированным нейтрофилам, **-достоверность различий характеристик по отношению к НГ, облучённых лазером с неизменной генерацией импульса, ***- достоверность различий характеристик по отношению к НГ, облучённых лазером с переменной генерацией импульса С учетом поправки Бонферрони критичный уровень р составил 0,003. U-критерий Мана- Уитни.
Может быть, увеличение содержания NO при действии НИЛИ происходит за счёт усиления окислительно-восстановительных действий, в том числе убыстрения реакции окисления аргинина ферментом NO-синтазой, результатом которой и является образование оксида азота (Артюхов В.Г., 2005). Выделяющийся в межклеточное место NO является реакционно-способным соединением с широким диапазоном био, в том числе, антибактериального деяния (Захарова М.А., 2003).
При исследовании содержания глюкозы в супернатантах неактивированных и активированных нейтрофилов доноров было отмечено, что в ответ на стимуляцию гранулоцитов лазером низкой интенсивности уровень глюкозы достоверно понижается (р<0,003, р=0,00023) с 4,95 до 2,01 мкмоль/л, может быть, таковой расход глюкозы, являющейся главным метаболитом биохимических действий вероятен вследствие увеличения энергетических издержек клеточки при её стимуляции лазерным излучением (Бережная Н.М., 1998; Маянский А.Н. и соавт., 1989).
Активация нейтрофилов лазером низкой интенсивности с неизменной генерацией импульса выявила рост уровня секреции ионов Са2+, в супернатантах нейтрофилов наиболее чем в 3 раза по сопоставлению с неактивированными нейтрофилами доноров. Вероятной предпосылкой роста концентрации ионов Са2+, опосля стимуляции НГ лазерным излучением является резвый выход из органел- кальциосом в цитозоль огромного количества ионов Са2+, в итоге чего же мы смотрим рост в супернатантах ионов кальция (Glossman H., 1999). Зарегистрированное понижение концентрации ионов Мg2+ может быть, происходят в итоге его расходования на процессы активации действий метаболизма, а конкретно катаболизма в клеточке (Эллиот В., 2000). Сравнительный анализ биохимического, цитокинового состава супернатантов нейтрофилов облучённых лазерным излучением с неизменной и переменной генерацией импульса показал, что, невзирая на разный количественный состав секреторных товаров, приобретенных в итоге активации клеточки лазерным излучением с неизменной и переменной генерацией импульса, данные конфигурации имели однонаправленный нрав.
Более важные конфигурации характеристик зарегистрированы при действии лазером с переменной генерацией импульса. Приобретенные нами данные о составе супернатантов нестимулированных и стимулированных нейтрофилов, в целом, совпадают с плодами исследования А.В. Чукичева (1996), И.Е.Третьяковой (2003). Зарегистрированное нами усиление многофункциональных способностей нейтрофилов и товаров их секреции с учётом биоэффективных доз действия лазерным излучением низкой интенсивности послужило основанием для проведения беспристрастного исследования иммунотропных эффектов действий лазерного излучения низкой интенсивности в практике.
Шаг исследования иммунотропных эффектов лазеров низкой интенсивности in vivo
На современном шаге вероятны 2 пути реализации эффектов деяния лазеров низкой интенсивности: эффекты, обусловленные их локальным и системным применением в терапевтических целях. Исходя из способностей внедрения лазеров красноватого диапазона излучения в терапевтической практике, представляло большой Энтузиазм исследование их способностей для устранения иммунологических дисфункций. В связи с вышеизложенными обстоятельствами, последующим шагом наших исследовательских работ сделалось исследование воздействия лазерного излучения на клеточные и гуморальные причины системного иммунитета, состояние нитроксидергической системы, липидного профиля периферической крови (внутренней средой организма человека и животных) при проведении внутрисосудистого лазерного облучения крови (внутренней средой организма человека и животных) (ВЛОК) у дам с хламидийной заразой нижнего отдела репродуктивного тракта.
У пациенток с воспалительными болезнями нижнего отдела репродуктивного тракта, вызванными хламидиями были выявлены сдвиги во всех изучаемых звеньях иммунной системы, соответствующие для приобретенного воспалительного процесса: лейкоцитоз, нейтрофилия с уменьшением абсолютного количества нейтрофилов, лимфоцитоз с конфигурацией субпопуляционного состава, выраженном в понижении процента лейкоцитов, несущих CD3, СD 4, СD 16; СD 20 нервные (относящиеся к пучкам нервов) импульсы По месту расположения и по выполняемым функциям выделяют экстерорецепторы интерорецепторы и пропри, повышении CD8+лимфоцитов, понижения СD 95+клеток, иммнорегуляторного индекса (СD 4+/CD8+), активности нейтрофилов по НСТ-тесту подавления фагоцитарной функции и многофункционального резерва нейтрофилов, усилении лизосомальной активности, повышении концентрации Ig A, Ig М, Ig G в сыворотке крови (внутренней средой организма человека и животных), понижения уровня циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), содержания С1-С3 компонент комплемента, СН 50, уровня ИЛ-1б, ИЛ-1в, ФНО-б, ИФН-г, дефенсинов, антибактериального протеина BPI, при повышении концентрации ИЛ-8. В согласовании с советами исцелению урогенитального хламидиоза внутрисосудистое лазерное облучение крови (внутренней средой организма человека и животных) (ВЛОК) быть может применено в комплексе целительных мероприятий.
]]>